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J-GLOBAL ID:202002210217334355   整理番号:20A0794064

ex vivo潅流ヒト肺からのエキソソームの単離と特性化【JST・京大機械翻訳】

Isolation and Characterization of Exosomes from Ex Vivo Perfused Human Lungs
著者 (5件):
資料名:
巻: 39  号: 4 S  ページ: S198  発行年: 2020年 
JST資料番号: W3128A  ISSN: 1053-2498  資料種別: 逐次刊行物 (A)
記事区分: 短報  発行国: オランダ (NLD)  言語: 英語 (EN)
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原発性移植片機能不全(PGD)は,肺移植後の罹患率と死亡率の重要な原因であり,ドナーに持続する傷害から部分的に生じる。サイズが30~150nmの範囲の細胞外小胞のクラスであるエキソソームは,炎症の重要な調節因子としてますます認識されている。エキソソームは肺同種移植片に対する抗ドナー反応に関与しており,PGDの病因において役割を果たしている可能性がある。ex vivo肺潅流(EVLP)からの潅流液は,その後のPGDに対する非侵襲的で予測的なバイオマーカーとして役立つ可能性のあるドナーエキソソームを調べるための潜在的なプラットフォームを表している。本研究では,EVLP潅流液中のエキソソームを同定し,特性化することを目的とした。EVLPを受けている5人のドナーヒト肺の1時間の灌流試料を収集し,2,000xgと10000xgで前処理し,その後,90分間,100,000xgで超遠心分離した。再懸濁ペレット中の粒子の濃度とサイズ分布をナノ粒子追跡分析(NTA)により得た。エキソソームの存在は,ウェスタンブロット法およびフローサイトメトリーによりエキソソーム濃縮蛋白質マーカーを調べることにより検証した。EVLP香料のナノ粒子分析は,サイズ≦200nmの平均1.257×10~11粒子/mL[図1]を明らかにした。CD9とCD81,正準テトラスパニンエキソソーム表面マーカーは,EVLP潅流液ではウェスタンブロット法により同定されたが,新鮮な潅流液では同定されなかった。他の標準テトラスパニン,CD63はこの技術を用いて見られなかった。対照的に,フローサイトメトリー(図3)は,EVLP潅流液試料からのエキソソームにおける3つのテトラスパニンの存在を示した。臨床EVLP潅流液は,NTA,ウェスタンブロット法およびフローサイトメトリーにより確認されたように,ドナー由来肺エキソソームを含む。著者らは,現在,それらの蛋白質と核酸含有量およびPGDのPGDとリスク因子との関係を調べている。Copyright 2020 Elsevier B.V., Amsterdam. All rights reserved. Translated from English into Japanese by JST.【JST・京大機械翻訳】
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分類 (1件):
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呼吸器疾患の外科療法 

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