抄録/ポイント：
抄録/ポイント
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ABSTRACT量子ドット(QDs)は,超輝度蛍光,優れた光安定性,狭い発光スペクトル,および選択色の光学的性質を有する。QDsで標識した単一分子/ウイルスは,長時間,迅速かつ連続的に画像化でき,他のフルオロフォアで標識したよりも詳細な情報を提供した。それらは単一分子追跡研究で蛋白質を標識するために広く用いられているが,QDは,主に受け入れられた標識戦略の欠如のため,ウイルス感染の研究にはほとんど使用されていない。ここでは,QDでエンベロープウイルスを穏やかかつ容易に標識する一般的な方法を報告する。脂質-ビオチン複合体を用いてウイルス脂質膜を認識,マークし,ストレプトアビジン-QD複合体を用いてそれらを光化した。そのような方法は,エンベロープウイルスを2時間で標識し,特異性と効率はそれぞれ99%と98%であった。ウイルスの無傷形態と自然感染性は保存された。このQD標識法の助けにより,野生型および変異型日本脳炎ウイルスを,生きているVero細胞でのそれらの感染を追跡し,エンベロープ蛋白質におけるH144AおよびQ258A置換がウイルスの細胞内輸送に影響しないことを見出した。本研究で記載された脂質特異的QD標識法は,ウイルスを容易に「探索」し,それらの感染を追跡するための手軽で実用的なツールを提供し,単一ウイルス追跡の広範な使用と複雑な感染機構の解明を促進する。宿主細胞におけるIMPORTANCEウイルス感染は多数の動的分子事象から成る複雑な過程である。単一ウイルス追跡は,これらの事象を研究するための多目的技術である。この技術を実行するため,ウイルスは蛍光顕微鏡に可視であるために蛍光標識する必要がある。量子ドットは多くのユニークな光学特性を持つ一種の蛍光タグである。それは,単一分子追跡研究における蛋白質標識に広く使用されているが,主に受け入れられた標識法の欠如のため,ウイルス感染の研究にはほとんど使用されていない。本研究では,脂質-ビオチン複合体でウイルスエンベロープ脂質を認識し,ストレプトアビジン-量子ドット複合体とこれらの脂質-ビオチン複合体を認識することにより,量子ドットでエンベロープウイルスを容易に,穏やか,特異的に標識する脂質特異的方法を開発した。それは正常なウイルスに適用できるだけでなく,重要な蛋白質変異ウイルスと不活性化された高毒性ウイルスを標識するのに適格であり,単一ウイルス追跡のための強力なツールを提供する。Please refer to the publisher for the copyright holders. Translated from English into Japanese by JST.【JST・京大機械翻訳】
