抄録/ポイント:
抄録/ポイント
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【目的】新生児ラット心臓線維芽細胞(CFs)の増殖とコラーゲン分泌に及ぼす高塩分の影響を観察し,その可能な機構を分析する。方法:膵臓酵素、II型コラゲナーゼの2段階消化法により、新生児ラット心筋組織を消化し、差動付着法により、新生児ラットCFsを収集、培養し、第4世代の血清を24時間まで同期化させ、対照群(培地Na+最終濃度139mmol/L)に分類し、対照群(培地Na+最終濃度139mmol/L)に分けた。高塩分群(培地Na+最終濃度146、149、152、155、158、161、164、167、170、173と176mmol/L)で、24、48、72と96h培養後、CCK-8でCFsの増殖状況を測定した。増殖作用の最も明らかなNa+濃度と作用時間を選び、Na+139mmol/Lを対照として後続実験を行って、高塩群(培地Na+最終濃度161mmol/L)、マンニトール群(マンニトール濃度29.334mg/ml)。マンニトール群と高塩分群の浸透圧は同じであった。CFsの増殖に及ぼす浸透圧の影響をCCK-8によって検出した。酵素結合免疫吸着検定法(ELISA)を用いて、CFs培養上清中のI型とIII型コラーゲンの発現を測定した。形質転換成長因子(TGF)-β1,p-smad3,およびsmad7蛋白質の発現をウェスタンブロット法によって検出した。【結果】CCK-8の結果は,Na+146-176mmol/Lが48時間,72時間で,ラットCFsの増殖を有意に促進することを示した(Na+161mmol/L,48時間)。浸透圧によるCFsの増殖は,高塩分群(Na+161mmol/L)では増殖が明らかであったが,マンニトール群の細胞は対照群(Na+139mmol/L)よりも増殖に差がなかった。ELISAの結果は,I型とIII型コラーゲンの発現が,高塩分群で増加し(P<0.05),マンニトール群でコラーゲンIとコラーゲンIII発現に有意差がないことを示した(P>0.05)。ウエスタンブロットの結果,TGF-β1およびp-smad3蛋白質の発現は,対照群およびマンニトール群に比して有意に高かった(P<0.05)が,smad7蛋白質発現は有意に減少した(P<0.05)。マンニトール群のTGF-β1,p-smad3,smad7蛋白質発現は対照群と有意差がなかった(P>0.05)。【結語】高塩分は,新生児ラットのCFsの増殖を誘発し,I型コラーゲンとIII型コラーゲンの分泌を増加させ,浸透圧の変化に関連せず,その機構はTGF-β1/smads発現に関連がある可能性がある。Data from Wanfang. Translated by JST.【JST・京大機械翻訳】