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J-GLOBAL ID：202002221119415923   整理番号：20A0934683

TaqMan-MGB二重プローブのリアルタイム蛍光定量的PCRによる迅速検出【JST・京大機械翻訳】

Rapid Detection of Campylobacter Jejuni with TaqMan-MGB Dual Probe Real-time Fluorescence Quantitative PCR

著者 (1件)： Gao Zhengqin (中国食品薬品検定研究院,北京,100050)
資料名： Xiandai Jianyan Yixue Zazhi  (Xiandai Jianyan Yixue Zazhi)
巻： 34  号： 6  ページ： 1-5,15  発行年： 2019年 
JST資料番号： C3895A  ISSN： 1671-7414  資料種別： 逐次刊行物 (A)
記事区分： 原著論文  発行国： 中国 (CHN)  言語： 中国語 (ZH)

抄録/ポイント： 【目的】特異的で高感度なTaqManMGB二重プローブリアルタイム蛍光定量的PCR法を開発し,Campylobacterjejuniの迅速な定量的検出に使用する。方法:Campylobacterjejuniの鞭毛蛋白質Aとウリカーゼ遺伝子に対して特異的プライマーとプローブを設計し、新型TaqMan-MGB二重プローブリアルタイム蛍光定量PCRによる空腸湾曲菌検出方法を確立し、この方法の定量測定に線形範囲、特異性、感度、再現性などを測定した。安定性を評価し、この方法を用いて臨床サンプル中の空腸湾曲菌に対して検査を行い、同時に細菌培養、普通PCR、遺伝子クローニングと配列分析で同定した。【結果】TaqManMGB二重プローブのリアルタイム蛍光定量的PCRは,特異的であり,他の細菌と交差反応がなく,特異性は100%であった。この技術は感度が高く、精確な定量で空腸の湾曲菌DNAの線形範囲が10オーダーに達し、最低の検出限界が4つのコロニー形成単位である。再現性と安定性は良好で、グループ内とグループ間の相対標準偏差は1%未満であった。この方法を応用して78例の臨床サンプルから28例の空腸湾曲菌陽性サンプルを定量的に検出でき、普通PCRと遺伝子クローン配列分析で確認し、細菌培養方法では6株の生存した空腸湾曲菌のみを獲得した。【結語】TaqManMGB二重プローブリアルタイム蛍光定量的PCRは,迅速,簡便,安定,特異的で感度が高く,臨床サンプル中の空腸カンピローマの定量的検出に使用可能であり,応用に値する。Data from Wanfang. Translated by JST.【JST・京大機械翻訳】

シソーラス用語： *蛍光 ,  細菌 ,  DNA【核酸】 ,  遺伝子 ,  空腸 ,  タンパク質 ,  尿酸オキシダーゼ ,  鞭毛 ,  検出法 ,  クローン ,  検出限界 ,  遺伝子クローニング ,  *定量的PCR法
準シソーラス用語： 細菌培養 ,  相対標準偏差 , 【Automatic Indexing@JST】

分類 (1件)： 微生物検査法  (EG02020G)

タイトルに関連する用語 (4件)： 二重プローブ ,  リアルタイム ,  蛍光 ,  定量的PCR