抄録/ポイント：
抄録/ポイント
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目的:核因子Y(NF-Y)によるKruppel様因子4(KLF4)の転写が乳癌細胞の増殖、移動に与える影響を検討する。方法:TCGAデータベースから乳癌のRNA-seqデータセットをダウンロードし、乳癌組織のNF-Y、KLF4mRNA発現データを採集し、両者の相関性を分析した。乳癌MCF-7細胞を選択し,それぞれ,shNF-Y#1,shNF-Y#2およびshCONレンチウイルスでNF-Y発現をサイレンシングし,NF-Y,KLF4mRNAおよび蛋白質発現を検出した。5-ブロモ-2-デオキシウラシル(EdU)挿入法とスルホニルローダミンB(SRB)実験を用いて、細胞増殖能力を測定し、スクラッチ試験を用いて細胞遊走能力を測定した。クロマチン免疫共沈降(ChIP)実験により、NF-YがKLF4プロモーターに結合でき、二重ルシフェラーゼレポーター遺伝子実験により、NF-YがKLF4プロモーターを活性化できることを検証した。【結果】Pearson相関分析は,乳癌組織におけるNF-YmR-NA発現とKLF4mRNA発現の間に正の相関があることを示した(P<0.05)。MCF-7-shNF-Y#1およびMCF-7-shNF-Y#2細胞におけるNF-Y,KLF4mR-NAおよび蛋白質発現は,MCF-7-shCON細胞(P<0.05)より低かった。MCF-7-shNF-Y#1細胞はMCF-7-shNF-Y#2細胞と比較して,P>0.05.EdU挿入法,SRB実験,およびスクラッチテストの結果,MCF-7-shNF-Y#1,B,およびB.MCF-7-shNF-Y#2細胞の増殖と遊走能はMCF-7-shCON細胞より低かった(P<0.05)が,MCF-7-shNF-Y#1細胞とMCF-7-shNF-Y#2細胞の間ではP>0.05であった。ChIP試験の結果、Input群、Histone3群、Sp1群、NF-Y群はいずれも相応のPCR産物を検出し、IgG群には相応のPCR産物が検出されなかった。ルシフェラーゼ活性PGL3-Basic+NF-Y群はPGL3-Basic+vector群より高く,PGL3-KLF4p+NF-Y群はPGL3-KLF4p+vector群よりも有意に高かった。PGL3-KLF4p+NF-Y群はPGL3-Basic+NF-Y群より高かった(P<0.05)。PGL3-Basic+vector群とPGL3-KLF4p+vector群のルシフェラーゼ活性はP>0.05であった。【結論】NF-Yは,KLF4転写の調節を通して乳癌細胞の増殖と移動を促進する。Data from Wanfang. Translated by JST.【JST・京大機械翻訳】
