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J-GLOBAL ID:202002223613383360   整理番号:20A2043186

ヒト血清中の25-ヒドロキシビタミンDの定量のための化学ルミネセンスイムノアッセイの開発【JST・京大機械翻訳】

Development of a Chemiluminescence Immunoassay for Quantification of 25-Hydroxyvitamin D in Human Serum
著者 (8件):
資料名:
巻: 2020  ページ: Null  発行年: 2020年 
JST資料番号: E0137C  ISSN: 2090-8865  資料種別: 逐次刊行物 (A)
記事区分: 原著論文  発行国: イギリス (GBR)  言語: 英語 (EN)
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本研究では,ヒト血清25-ヒドロキシビタミンD(25(OH)D)に対する化学ルミネセンス免疫アッセイ(CLIA)を競合モデルにより確立した。血清では,総循環25(OH)Dの99%以上が蛋白質に結合し,25(OH)Dの1%未満が遊離型(Jassil et al.,2017)であった。血清中の25(OH)Dの濃度を測定する前に,放出手順を行うべきである。新しい試薬を用いて結合25(OH)Dを遊離型に放出した。ストレプトアビジン(SA)を1-エチル-3-(3-ジメチルアミノプロピル)カルボジイミド/N-ヒドロキシスクシンイミド(EDC/NHS)法により磁性ビーズに標識した。ビオチン化VDを試料中の25(OH)Dの競合剤として用いた。抗VD抗体(aby)をEDCによりセイヨウワサビペルオキシダーゼ(HRP)に標識し,25(OH)D及びビオチニル化VD分子と反応させた。前処理試料または標準品をビオチン-VDおよび抗VD aby-HRP,遊離25(OH)Dを抗VD aby-HRPに結合するビオチン化VDと競合させて,SA標識磁性粒子を添加してシグナル生成複合体を分離し,シグナルは試料中の25(OH)D濃度に逆比例した。確立した方法は良い熱安定性と性能を示した。検出限界(LoD)は1.43ng/mLであった。分析内変動係数(CV)は3.66%~6.56%であり,試験間CVは4.19%~7.01%であり,回収率は93.22%~107.99%であった。交差反応性(CR)はビタミンD2,ビタミンD3,1,25-ジヒドロキシビタミンD3,および1,25-ジヒドロキシビタミンD2で顕著に低かった。同時に,25-ヒドロキシビタミンD_2と25-ヒドロキシビタミンD_3との交差反応値は,それぞれ97%と100%であった。開発した方法は,RocheとDiaSorinからの全VD製品と良い相関を示した。臨床患者1096例を本研究で開発した試薬キットで測定した。7種類の疾患が関与し,25(OH)Dの濃度は患者の94.98%で30ng/mL未満である。Copyright 2020 Shuang Han et al. Translated from English into Japanese by JST.【JST・京大機械翻訳】
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分類 (2件):
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ビタミンD  ,  バイオアッセイ 
物質索引 (1件):
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引用文献 (18件):
  • N. K. Jassil, A. Sharma, D. Bikle, X. Wang, "Vitamin D binding protein and 25-hydroxyvitamin D levels: emerging clinical applications," Endocrine Practice, vol. 23, no. 5, pp. 605-613, 2017.
  • P. H. Anderson, "Vitamin D activity and metabolism in bone," Current Osteoporosis Reports, vol. 15, no. 5, pp. 443-449, 2017.
  • P. Lips, N. M. van Schoor, "The effect of vitamin D on bone and osteoporosis," Best Practice & Research Clinical Endocrinology & Metabolism, vol. 25, no. 4, pp. 585-591, 2011.
  • B. W. Hollis, C. L. Wagner, "Assessment of dietary vitamin D requirements during pregnancy and lactation," The American Journal of Clinical Nutrition, vol. 79, no. 5, pp. 717-726, 2004.
  • B. W. Hollis, C. L. Wagner, "Vitamin D requirements during lactation: high-dose maternal supplementation as therapy to prevent hypovitaminosis D for both the mother and the nursing infant," The American Journal of Clinical Nutrition, vol. 80, no. 6, pp. 1752S-1758S, 2004.
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