抄録/ポイント：
抄録/ポイント
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【目的】マイクロRNA-1254(miR-1254)によるヒト骨肉腫細胞の増殖,遊走,および浸潤に及ぼすhsa_circ_0004674(miR-1254)の抑制効果を調査するため,環状RNA(circRNA)を標的とした,hsa_circ_0004674のinvitroでの研究を目的とした,ヒト骨肉腫細胞の増殖,遊走,および浸潤に及ぼす上皮成長因子受容体(EGFR)の効果を調査する。【方法】MG63細胞で発現されたcircRNAをマイクロアレイ分析でスクリーニングし,骨肉腫細胞MG63と正常骨芽細胞のNHOstにおけるhsa_circ_0004674の発現をリアルタイム蛍光定量的PCR(RT-PCR)によって検出した。MG63細胞の増殖,浸潤と遊走能に及ぼすhsa_circ_0004674の影響を分析した。miRandaはhsa_circ_0004674とmiR-1254間の結合部位を予測し,hsa_circ_0004674とmiR-1254の相互作用を二重ルシフェラーゼレポーター遺伝子で検出した。hsa_circ_0004674は,MG63細胞の増殖,浸潤,および移動に及ぼすmiR-1254のスポンジとして用いられた。TargetScanはmiR-1254とEGFR間の結合部位を予測し、二重ルシフェラーゼレポーター遺伝子はmiR-1254とEGFRの相互作用を測定し、EGFRがMG63細胞の増殖、浸潤と移動に与える影響を分析した。細胞増殖,浸潤および遊走能を,細胞クローン形成実験,細胞侵入試験および細胞スクラッチ試験により検出した。CCK-8法を用いて,MG63細胞の生存率に及ぼすEGFRの影響を検出し,そして,EGFRの発現に及ぼすhsa_circ_0004674とmiR-1254の影響と,EGFRの過剰発現によるMG63細胞におけるBaxとBaxの発現を,ウエスタンブロット法によって検出した。Bcl-2発現の影響を観察した。【結果】NHOst細胞と比較して,MG63細胞におけるhsa_circ_0004674の発現レベルは上方制御され(P<0.01),miR-1254の発現レベルは下方制御され(P<0.01),EGFRmRNA発現は上方制御された(P<0.05)。01)は,hsa_circ_0004674またはEGFR発現を妨害し,MG63細胞の増殖,浸潤および移動を阻害した。miR-1254の過剰発現は,MG63細胞の増殖,浸潤および移動を阻害することができ,miR-1254の干渉は,MG63細胞の増殖,浸潤および移動を促進することができた。miR-1254発現のみと比較して,hsa_circ_0004674とmiR-1254の発現を阻害すると,hsa_circ_0004674発現のダウンレギュレーションは,miR-1254発現のダウンレギュレーションが細胞機能に及ぼす影響が部分的に逆転した。hsa_circ_00046743’UTRはmiR-1254と特異的に結合し、miR-1254の発現活性を調節する。miR-1254はEGFR3’UTRと特異的に結合し、EGFRの発現を調節する。miR-1254の過剰発現はMG63細胞の活力を低下させ,EGFRの過剰発現はMG63細胞の活力を増加した。miR-1254の過剰発現はMG63細胞におけるBaxの発現を促進し,Bcl-2の発現を抑制し,EGFRの過剰発現はMG63細胞におけるBaxの発現を抑制し,Bcl-2の発現を促進した。【結語】hsa_circ_0004674は,miR-1254によってEGFR発現を調節して,骨肉腫細胞の増殖,移動および浸潤を調整する。Data from Wanfang. Translated by JST.【JST・京大機械翻訳】
