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J-GLOBAL ID：202002226334450081   整理番号：20A2657582

無細胞in vitro系を用いた組換生産前駆体ペプチドpqqAのピロロキノリンキノン(PQQ)への生物変換【JST・京大機械翻訳】

Bioconversion of recombinantly produced precursor peptide pqqA into pyrroloquinoline quinone (PQQ) using a cell-free in vitro system

著者 (14件)： Wang Guanglu (Laboratory of Biotransformation and Biocatalysis, School of Food and Biological Engineering, Zhengzhou University of Light Industry, Zhengzhou, Henan, 450000, People’s Republic of China) ,  Wang Guanglu (School of Food and Bioengineering/Collaborative Innovation Center for Production and Safety, Zhengzhou University of Light Industry, Zhengzhou, Henan, 450001, People’s Republic of China) ,  Zhou Yifei (Laboratory of Biotransformation and Biocatalysis, School of Food and Biological Engineering, Zhengzhou University of Light Industry, Zhengzhou, Henan, 450000, People’s Republic of China) ,  Zhou Yifei (School of Food and Bioengineering/Collaborative Innovation Center for Production and Safety, Zhengzhou University of Light Industry, Zhengzhou, Henan, 450001, People’s Republic of China) ,  Ma Ke (Laboratory of Biotransformation and Biocatalysis, School of Food and Biological Engineering, Zhengzhou University of Light Industry, Zhengzhou, Henan, 450000, People’s Republic of China) ,  Ma Ke (School of Food and Bioengineering/Collaborative Innovation Center for Production and Safety, Zhengzhou University of Light Industry, Zhengzhou, Henan, 450001, People’s Republic of China) ,  Zhang Fan (Laboratory of Biotransformation and Biocatalysis, School of Food and Biological Engineering, Zhengzhou University of Light Industry, Zhengzhou, Henan, 450000, People’s Republic of China) ,  Zhang Fan (School of Food and Bioengineering/Collaborative Innovation Center for Production and Safety, Zhengzhou University of Light Industry, Zhengzhou, Henan, 450001, People’s Republic of China) ,  Ye Jianbin (Laboratory of Biotransformation and Biocatalysis, School of Food and Biological Engineering, Zhengzhou University of Light Industry, Zhengzhou, Henan, 450000, People’s Republic of China) ,  Ye Jianbin (School of Food and Bioengineering/Collaborative Innovation Center for Production and Safety, Zhengzhou University of Light Industry, Zhengzhou, Henan, 450001, People’s Republic of China) ,  Zhong Guifang (Laboratory of Biotransformation and Biocatalysis, School of Food and Biological Engineering, Zhengzhou University of Light Industry, Zhengzhou, Henan, 450000, People’s Republic of China) ,  Zhong Guifang (School of Food and Bioengineering/Collaborative Innovation Center for Production and Safety, Zhengzhou University of Light Industry, Zhengzhou, Henan, 450001, People’s Republic of China) ,  Yang Xuepeng (Laboratory of Biotransformation and Biocatalysis, School of Food and Biological Engineering, Zhengzhou University of Light Industry, Zhengzhou, Henan, 450000, People’s Republic of China) ,  Yang Xuepeng (School of Food and Bioengineering/Collaborative Innovation Center for Production and Safety, Zhengzhou University of Light Industry, Zhengzhou, Henan, 450001, People’s Republic of China)
資料名： Protein Expression and Purification  (Protein Expression and Purification)
巻： 178  ページ： Null  発行年： 2021年 
JST資料番号： W0282A  ISSN： 1046-5928  資料種別： 逐次刊行物 (A)
記事区分： 原著論文  発行国： オランダ (NLD)  言語： 英語 (EN)

抄録/ポイント： ピロキノリンキノン(PQQ)は,よく知られたニコチンアミド(NAD(P)+)およびフラビン(FAD,FMN)に加えて,酸化還元補因子の3番目のクラスとして認識されてきた。それは種々の生物で重要な生理学的役割を果たし,強い抗酸化特性を持っている。PQQの生合成経路は,pqqA-Gと名付けた4~7遺伝子からなる遺伝子クラスターを含み,その中でpqqAは前駆体ペプチドPqqAをコードするPQQ合成のための重要な遺伝子である。大腸菌において組換えPqqAを生産するために,融合タグを用いて,ペプチドの安定性と溶解性を増加し,発酵プロセスのスケールアップを簡素化した。本論文では,Gluconobacter oxydans 621H由来のpqqAをSUMOと融合蛋白質として大腸菌BL21(DE3)で発現させ,ヘキサヒスチジン(His6)標識を用いて精製した。SUMO融合蛋白質とHis6タグを特異的に認識し,SUMO特異的ULPプロテアーゼにより切断し,固定化金属アフィニティークロマトグラフィーを用いて高純度前駆体ペプチドPqqAを得た。標的蛋白質の発現と精製を,トリシン-SDS-PAGEによって確認した。最後に,in vitroでの無細胞酵素反応におけるPQQの合成をLC-MSにより確認した。Copyright 2020 Elsevier B.V., Amsterdam. All rights reserved. Translated from English into Japanese by JST.【JST・京大機械翻訳】

シソーラス用語： 簡素化 ,  大腸菌 ,  *ペプチド ,  遺伝子 ,  酵素反応 ,  酸化還元反応 ,  ペプチド結合ヒドロラーゼ ,  *前駆体 ,  LC-MS分析 ,  *in vitro実験 ,  融合タンパク質 ,  補因子
準シソーラス用語： Gluconobacter oxydans ,  フラビン ,  ヘキサヒスチジン , 【Automatic Indexing@JST】

著者キーワード (3件)： 組換えPqqA ,  SUMO ,  in vitro合成

分類 (2件)： 遺伝子操作  (EC02050B) ,  遺伝子発現  (EC02040Q)

タイトルに関連する用語 (7件)： 細胞 ,  組換 ,  前駆体 ,  ペプチド ,  ピロロキノリンキノン ,  PQQ ,  生物変換