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J-GLOBAL ID：202002227060305569   整理番号：20A2418994

リジンデメチラーゼ2Aの全長及び切断組換えプラスミドの構築及び細胞への定位【JST・京大機械翻訳】

Construction of recombinant plasmid encoding full -length and truncated mutations of KDM2A and subcellular distribution of recombinant proteins

著者 (3件)： Yang Fan (中国医科大学生命科学学院,衛生部細胞生物学重点実験室,教育部医学細胞生物学重点実験室,染色質生物学研究室,遼寧 沈陽 110122) ,  Zhao Yue (中国医科大学生命科学学院,衛生部細胞生物学重点実験室,教育部医学細胞生物学重点実験室,染色質生物学研究室,遼寧 沈陽 110122) ,  Wang Chunyu (中国医科大学生命科学学院,衛生部細胞生物学重点実験室,教育部医学細胞生物学重点実験室,染色質生物学研究室,遼寧 沈陽 110122)
資料名： Xiandai Zhongliu Yixue  (Xiandai Zhongliu Yixue)
巻： 28  号： 17  ページ： 2922-2926  発行年： 2020年 
JST資料番号： C3555A  ISSN： 1672-4992  資料種別： 逐次刊行物 (A)
記事区分： 原著論文  発行国： 中国 (CHN)  言語： 中国語 (ZH)

抄録/ポイント： 目的:リジンデメチラーゼ2A(lysinedemethylase2A、KDM2A)の全長及び切断組換え発現プラスミドを構築し、その前立腺癌CWR22Rv1細胞における定位及び機序を初歩的に探求する。方法;KDM2AのmRNAコード配列とタンパク質ドメインの特徴に基づき、KDM2A全長と切断発現配列のプライマーを設計し、KDM2Aの全長コード配列を含むプラスミドをテンプレートとし、PCRにより目的フラグメントを増幅する。制限エンドヌクレアーゼNotIとXbaIを用いて二重酵素消化を行い、連結形質転換後、モノクローナルコロニーを増幅させ、プラスミドを抽出し、制限酵素同定と配列アラインメントを行った。KDM2Aの全長と切断組換えプラスミドをHEK293細胞に形質移入し,HEK293細胞におけるKDM2Aの全長と切断蛋白質の発現を検出した。構築したKDM2A全長及び切断組換えプラスミドを前立腺癌CWR22Rv1細胞にトランスフェクションし、免疫蛍光染色を行い、外来のKDM2A全長及び切断タンパク質が細胞中の定位を測定した。結果:KDM2Aの全長と切断組換えプラスミドを構築し、組換えプラスミドは細胞に発現でき、KDM2A全長タンパク質は主に細胞核に分布し、細胞質に少量に分布し、C1切断タンパク質は細胞核に分布し、N1、C2切断タンパク質は細胞質に分布する。結論:KDM2A蛋白の核定位配列は564-888位のアミノ酸の間にあり、本実験はKDM2Aの腫瘍における作用及び分子メカニズムの今後の研究に実験的基礎を提供した。Data from Wanfang. Translated by JST.【JST・京大機械翻訳】

シソーラス用語： アミノ酸 ,  mRNA ,  細胞核 ,  細胞質 ,  タンパク質 ,  酵素的分解 ,  *メチルトランスフェラーゼ ,  *プラスミド ,  *定位 ,  トランスフェクション ,  前立腺腫瘍 ,  DNA制限酵素 ,  HEK293細胞 ,  分子機構 ,  脂肪族アミン ,  脂肪族カルボン酸 ,  第一アミン

分類 (3件)： 腫ようの化学・生化学・病理学  (GE02030N) ,  生物学的機能  (EB03040U) ,  分子遺伝学一般  (EC02010J)

物質索引 (1件)： リジン

タイトルに関連する用語 (4件)： 組換えプラスミド ,  構築 ,  細胞 ,  定位