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J-GLOBAL ID：202002229515730389   整理番号：20A1922787

融合蛋白質法を用いたHelianthus annuus Linnからのけい皮酸4-ヒドロキシラーゼの機能的特性化【JST・京大機械翻訳】

Functional characterization of cinnamate 4-hydroxylase from Helianthus annuus Linn using a fusion protein method

著者 (8件)： Wang Ziwen (Jiangsu Key Laboratory of Bioactive Natural Product Research and State Key Laboratory of Natural Medicines, School of Traditional Chinese Pharmacy, China Pharmaceutical University, 24 Tong Jia Xiang, Nanjing 210009, People’s Republic of China) ,  Jian Xiangyun (Jiangsu Key Laboratory of Bioactive Natural Product Research and State Key Laboratory of Natural Medicines, School of Traditional Chinese Pharmacy, China Pharmaceutical University, 24 Tong Jia Xiang, Nanjing 210009, People’s Republic of China) ,  Zhao Yucheng (Jiangsu Key Laboratory of Bioactive Natural Product Research and State Key Laboratory of Natural Medicines, School of Traditional Chinese Pharmacy, China Pharmaceutical University, 24 Tong Jia Xiang, Nanjing 210009, People’s Republic of China) ,  Li Shan (Jiangsu Key Laboratory of Bioactive Natural Product Research and State Key Laboratory of Natural Medicines, School of Traditional Chinese Pharmacy, China Pharmaceutical University, 24 Tong Jia Xiang, Nanjing 210009, People’s Republic of China) ,  Sui Ziwei (Jiangsu Key Laboratory of Bioactive Natural Product Research and State Key Laboratory of Natural Medicines, School of Traditional Chinese Pharmacy, China Pharmaceutical University, 24 Tong Jia Xiang, Nanjing 210009, People’s Republic of China) ,  Li Li (Jiangsu Key Laboratory of Bioactive Natural Product Research and State Key Laboratory of Natural Medicines, School of Traditional Chinese Pharmacy, China Pharmaceutical University, 24 Tong Jia Xiang, Nanjing 210009, People’s Republic of China) ,  Kong Lingyi (Jiangsu Key Laboratory of Bioactive Natural Product Research and State Key Laboratory of Natural Medicines, School of Traditional Chinese Pharmacy, China Pharmaceutical University, 24 Tong Jia Xiang, Nanjing 210009, People’s Republic of China) ,  Luo Jun (Jiangsu Key Laboratory of Bioactive Natural Product Research and State Key Laboratory of Natural Medicines, School of Traditional Chinese Pharmacy, China Pharmaceutical University, 24 Tong Jia Xiang, Nanjing 210009, People’s Republic of China)
資料名： Gene  (Gene)
巻： 758  ページ： Null  発行年： 2020年 
JST資料番号： E0701B  ISSN： 0378-1119  資料種別： 逐次刊行物 (A)
記事区分： 原著論文  発行国： オランダ (NLD)  言語： 英語 (EN)

抄録/ポイント： ヒマワリ(Helianthus annuus L.)は重要な油作物であり,その二次代謝産物はフラボノイドやリグニンのような多くの化合物を含む。しかし,ヒマワリにおけるフェノール化合物の生合成に関する研究は,まだ不足している。けい皮酸4-ヒドロキシラーゼ(C4H)はチトクロームP450依存性モノオキシゲナーゼファミリーに属し,多くのフェノール化合物の合成に関与するが,ヒマワリにおけるC4Hはまだクローン化されておらず,機能的に特性化されていない。本研究では,それぞれHaC4H1,HaC4H2およびHaC4H3と命名したヒマワリトランスクリプトームおよびゲノムデータベースから3つのC4H遺伝子をスクリーニングした。異種発現実験で,著者らは,複数のC4H機能を発現し,in vitro活性検証に適するように,制限部位の追加による以前の研究からの方法を改善した。N末端膜アンカー領域のないHaC4HsをArabidopsis thalianaのチトクロームP450酵素(CYP450)の酸化還元パートナーと融合させ,大腸菌で機能的に発現させ,これら3つの酵素がp-クマル酸の形成を触媒することを示した。融合蛋白質法が他のC4Hsに適用できるかどうかをさらに調べるために,この方法を用いて,Peucedanum praeptorumおよびAngelica decursivaからのC4Hの機能を調べ,また,trans-けい皮酸をp-クマル酸に変換することができた。遺伝子発現プロフィールは,すべての3つのHaC4H遺伝子が根で最も高い転写レベルを示し,MeJAによって上方制御されるかもしれないことを示した。まとめると,これらの結果は,ヒマワリにおけるHaC4Hの機能を明らかにし,原核生物発現系におけるC4Hおよび他のチトクロームP450酵素を探索する簡単な方法を提供する。Copyright 2020 Elsevier B.V., Amsterdam. All rights reserved. Translated from English into Japanese by JST.【JST・京大機械翻訳】

シソーラス用語： リグニン ,  農作物 ,  酵素 ,  大腸菌 ,  生合成 ,  遺伝子 ,  *ヒマワリ ,  フラボノイド ,  シシウド属 ,  クローン ,  in vitro実験 ,  Arabidopsis thaliana ,  トランスクリプトーム
準シソーラス用語： *ヒドロキシラーゼ ,  異種発現 , 【Automatic Indexing@JST】

著者キーワード (4件)： フェニルプロパノイド経路 ,  チトクロームP450酵素 ,  ポリフェノール化合物 ,  蛋白質発現法

分類 (3件)： 遺伝子操作  (EC02050B) ,  細胞構成体一般  (EF03010Z) ,  遺伝子発現  (EC02040Q)

タイトルに関連する用語 (5件)： 融合蛋白質 ,  Helianthus ,  けい皮酸 ,  ヒドロキシラーゼ ,  特性化