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J-GLOBAL ID:202002230159400970   整理番号:20A1205446

ペプチジルプロリルイソメラーゼおよびPyropia yezoensis(PYCYP)由来の組換え蛋白質シクロフィリンの生物学的活性【JST・京大機械翻訳】

Peptidyl-prolyl isomerase and the biological activities of recombinant protein cyclophilin from Pyropia yezoensis (PyCyp)
著者 (5件):
資料名:
巻: 172  ページ: Null  発行年: 2020年 
JST資料番号: W0282A  ISSN: 1046-5928  資料種別: 逐次刊行物 (A)
記事区分: 原著論文  発行国: オランダ (NLD)  言語: 英語 (EN)
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シクロフィリンはペプチジルプロリルシス-トランスイソメラーゼ活性(PPIase)に関連する高度に保存された蛋白質である。本研究は,海洋紅藻Pyropia yezoensis(PyCyp)からの組換えシクロフィリンの生物学的活性を分析するために設計された。P.yezoensisからのシクロフィリン遺伝子をpPROEX-hta発現ベクターにクローン化した。プラスミドを高効率変換によりBL21大腸菌に形質転換した。組換え蛋白質を0.1mM IPTGを用いて発現させ,融合蛋白質をアフィニティークロマトグラフィーにより精製した。HisタグはTEVプロテアーゼにより除去された。組換え蛋白質をHiPrep Sephacryl S-200 HRカラム上でさらに精製し,Sep-pakプラスC_18カラムを用いた逆相高速液体クロマトグラフィーにより精製した。精製したシクロフィリンを種々の分析法により特性化し,そのペプチジルプロリルイソメラーゼ活性を分析した。組換えPyCypはcis-trans異性化を触媒することを示した。PyCypはグラム陽性およびグラム陰性細菌培養の両方に対する抗菌活性についても評価され,試験した病原体に対して有意な抗菌活性を示した。PyCypは黄色ぶどう球菌によるSYTOXグリーン取り込みアッセイにおいて蛍光強度の増加により証明されるように細菌膜を透過することを示した。PyCypのラジカル消去活性は用量依存的に増加し,有意な抗酸化活性を示した。本研究は,海洋藻類からの治療蛋白質の開発のための情報を提供する。Copyright 2020 Elsevier B.V., Amsterdam. All rights reserved. Translated from English into Japanese by JST.【JST・京大機械翻訳】
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遺伝子操作  ,  蛋白質・ペプチド一般 
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