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J-GLOBAL ID:202002235682943176   整理番号:20A1207021

動的サンプリングプラットフォーム(DSP)によるMSCおよび腫瘍細胞セクレトームの局所探索【JST・京大機械翻訳】

Probing MSC and Tumor Cell Secretome Locally via Dynamic Sampling Platform (DSP)
著者 (6件):
資料名:
巻: 22  号: 5 S  ページ: S14-S15  発行年: 2020年 
JST資料番号: W1781A  ISSN: 1465-3249  資料種別: 逐次刊行物 (A)
記事区分: 短報  発行国: オランダ (NLD)  言語: 英語 (EN)
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如何なる細胞培養の中でも,特に市販のバイオリアクタのより大きなスケールでは,最終的な細胞生成物に直接影響するかなりの不均一性がある。この変化は,細胞により経験される局所せん断力および生化学的微小環境,例えば,代謝産物および分泌された蛋白質因子から部分的に生じ,それらは,近傍細胞を修飾するためにパラクリン様式で作用できる。高い空間的および時間的分解能を有するこれらの重要な品質属性(CQA)バイオマーカーを測定する能力は,細胞製造のためのリアルタイム品質監視の開発にとって基本的である。標準分析法は細胞増殖の局所的不均一性も過渡的性質も定量化しない。動的サンプリングプラットフォーム(DSP,図形1)は,インラインエレクトロスプレイイオン化質量分析(ESI-MS)による迅速,高忠実度,および無標識CQA同定のためのセクレトームの局所サンプリングを可能にすることにより,両方の障壁を克服する。DSPによる微小環境のリアルタイムモニタリングは,細胞の健康,生存性,および効力を予測するのに役立ち,したがって,細胞に基づく治療のスケールアップおよびスケールアウトのための化学,製造および管理(CMC)基準を可能にする。ESI-MSセンシングによるDSPは,細胞セクレトームのESI-MS検出のための細胞培養バイオリアクタから直接採取した超小型試料の連続収集,処理及び直接注入を可能にした。DSP-ナノESI-MSは3つの元素から成る。1)非侵襲的サンプリングインターフェース,2D細胞培養から連続的に試料をサンプリングする能力を示した。2)MS分析に有害な化合物,例えば無機塩を同時に除去する試料処理のための微細加工質量交換器,及びMS感度を増強する化合物を紹介した。3)直接注入ナノESI-MS分析のためのスプレーポートは,細胞培養における生体分子の同定/フィンガープリントをもたらした。DSPは,細胞状態に関連するセクレトームの違いを同定するために,複数の生細胞培養に適用されてきた。野生型対インターフェロンγプライム化間充織間質細胞(MSCs)およびOS-17と143-B腫瘍細胞型の分析は,異なる細胞型に関連した濃縮ESI-MS特徴を明らかにした。DSPによる局在化サンプリングは,細胞膜対バルク試料の近くのより高い濃度のバイオマーカーを捕捉するために重要であることが示され,これは培地内の過剰な生化学的背景によりマスクされる。動的サンプリングプラットフォーム(DSP)サンプルは,高い空間分解能を持つ細胞培養から直接細胞状態と成長軌跡を示す臨界品質属性(CQA)生体分子を捕捉するために直接的にサンプリングする。微細加工した質量交換器を用いた迅速なインライン試料処理は,無機塩のような汚染物質を除去し,ESI-MS分析の感度を高める化学物質を注入する。より大きなCQAバイオマーカーは,サイズ選択的ナノ膜により試料チャンネル中に選択的に保持され,一方,より小さい汚染物質と膜を通してのエンハンサー移動が自由に保持された。実時間エレクトロスプレイイオン化質量分析(ESI-MS)は,化学組成の事前知識を持たない広い範囲のCQA生体分子の検出と同定を提供する。Copyright 2020 Elsevier B.V., Amsterdam. All rights reserved. Translated from English into Japanese by JST.【JST・京大機械翻訳】
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分類 (3件):
分類
JSTが定めた文献の分類名称とコードです
細胞・組織培養法  ,  細胞生理一般  ,  培養工学一般 

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