抄録/ポイント:
抄録/ポイント
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デジタルPCR(dPCR)技術を適用したABSTRACTは,臨床的および工業的検出作業を困難にするため,絶対定量および希少標的検出の能力のため,より一般的になってきた。しかし,定量PCR(qPCR)から学んだ実践は,アッセイのロバスト性と広範囲の有用性を促進するが,dPCRでは容易に適用できない。これらは偽陰性反応とアンプリコン高分解能融解(HRM)解析を説明する内部増幅制御を含み,偽陽性から真の陽性を識別する。dPCRにおける内部増幅制御の組み込みは,ほとんどの機械で利用可能な限られた蛍光チャンネルのために挑戦的であり,HRM分析の応用は,ほとんどのdPCRシステムにおける加熱とイメージング機能の分離によって妨げられる。dPCRにおける偽陽性と偽陰性の軽減のためのHRMベースアプローチの有用性を評価するために,カスタムディジタルHRMプラットフォームを使用した。dHRM分析を用いた外因性内部制御の検出は偽陰性分配の包含を減少させ,計算DNA濃度を52%まで変化させることを示した。dHRM分析の統合は,別個にあいまいな「降雨」と考えられる分割の分類を可能にし,これは,それぞれ,挿入染料と加水分解プローブdPCRにおける分配の約3%と~10%を占める。dPCR-dHRMにおける広範な微生物検出に適合する内部制御法の開発に焦点を当てた。本アプローチは微生物プロファイリングを含む多数のDNA検出法に適用でき,正確な定量が必須である臨床応用におけるdPCRの有用性を前進させる。Please refer to the publisher for the copyright holders. Translated from English into Japanese by JST.【JST・京大機械翻訳】