文献

J-GLOBAL ID：202002240631127790   整理番号：20A2761666

CNSにおける遺伝子発現の迅速かつ費用効果的な操作のための最小精製分泌rAAVの利用【JST・京大機械翻訳】

Utilizing minimally purified secreted rAAV for rapid and cost-effective manipulation of gene expression in the CNS

著者 (42件)： Goodwin Marshall S. (Department of Neuroscience, College of Medicine, University of Florida, Gainesville, USA) ,  Goodwin Marshall S. (Center for Translational Research in Neurodegenerative Disease, College of Medicine, University of Florida, Gainesville, USA) ,  Croft Cara L. (Department of Neuroscience, College of Medicine, University of Florida, Gainesville, USA) ,  Croft Cara L. (Center for Translational Research in Neurodegenerative Disease, College of Medicine, University of Florida, Gainesville, USA) ,  Futch Hunter S. (Department of Neuroscience, College of Medicine, University of Florida, Gainesville, USA) ,  Futch Hunter S. (Center for Translational Research in Neurodegenerative Disease, College of Medicine, University of Florida, Gainesville, USA) ,  Ryu Daniel (Department of Neuroscience, College of Medicine, University of Florida, Gainesville, USA) ,  Ryu Daniel (Center for Translational Research in Neurodegenerative Disease, College of Medicine, University of Florida, Gainesville, USA) ,  Ceballos-Diaz Carolina (Department of Neuroscience, College of Medicine, University of Florida, Gainesville, USA) ,  Ceballos-Diaz Carolina (Center for Translational Research in Neurodegenerative Disease, College of Medicine, University of Florida, Gainesville, USA) ,  Liu Xuefei (Department of Neuroscience, College of Medicine, University of Florida, Gainesville, USA) ,  Liu Xuefei (Center for Translational Research in Neurodegenerative Disease, College of Medicine, University of Florida, Gainesville, USA) ,  Paterno Giavanna (Department of Neuroscience, College of Medicine, University of Florida, Gainesville, USA) ,  Paterno Giavanna (Center for Translational Research in Neurodegenerative Disease, College of Medicine, University of Florida, Gainesville, USA) ,  Mejia Catalina (Department of Neuroscience, College of Medicine, University of Florida, Gainesville, USA) ,  Mejia Catalina (Center for Translational Research in Neurodegenerative Disease, College of Medicine, University of Florida, Gainesville, USA) ,  Deng Doris (Department of Neuroscience, College of Medicine, University of Florida, Gainesville, USA) ,  Deng Doris (Center for Translational Research in Neurodegenerative Disease, College of Medicine, University of Florida, Gainesville, USA) ,  Menezes Kimberly (Department of Neuroscience, College of Medicine, University of Florida, Gainesville, USA) ,  Menezes Kimberly (Center for Translational Research in Neurodegenerative Disease, College of Medicine, University of Florida, Gainesville, USA) ,  Londono Laura (Department of Neuroscience, College of Medicine, University of Florida, Gainesville, USA) ,  Londono Laura (Center for Translational Research in Neurodegenerative Disease, College of Medicine, University of Florida, Gainesville, USA) ,  Arjona Kefren (Department of Neuroscience, College of Medicine, University of Florida, Gainesville, USA) ,  Arjona Kefren (Center for Translational Research in Neurodegenerative Disease, College of Medicine, University of Florida, Gainesville, USA) ,  Parianos Mary (Department of Neuroscience, College of Medicine, University of Florida, Gainesville, USA) ,  Parianos Mary (Center for Translational Research in Neurodegenerative Disease, College of Medicine, University of Florida, Gainesville, USA) ,  Truong Van (Department of Neuroscience, College of Medicine, University of Florida, Gainesville, USA) ,  Truong Van (Center for Translational Research in Neurodegenerative Disease, College of Medicine, University of Florida, Gainesville, USA) ,  Rostonics Eva (Department of Neuroscience, College of Medicine, University of Florida, Gainesville, USA) ,  Rostonics Eva (Center for Translational Research in Neurodegenerative Disease, College of Medicine, University of Florida, Gainesville, USA) ,  Hernandez Amanda (Department of Neuroscience, College of Medicine, University of Florida, Gainesville, USA) ,  Hernandez Amanda (Center for Translational Research in Neurodegenerative Disease, College of Medicine, University of Florida, Gainesville, USA) ,  Boye Sanford L. (Department of Pediatrics and the Powell Gene Therapy Center, University of Florida, Gainesville, USA) ,  Boye Shannon E. (Department of Ophthalmology, University of Florida, Gainesville, USA) ,  Levites Yona (Department of Neuroscience, College of Medicine, University of Florida, Gainesville, USA) ,  Levites Yona (Center for Translational Research in Neurodegenerative Disease, College of Medicine, University of Florida, Gainesville, USA) ,  Levites Yona (McKnight Brain Institute, College of Medicine, University of Florida, Gainesville, USA) ,  Cruz Pedro E. (Department of Neuroscience, College of Medicine, University of Florida, Gainesville, USA) ,  Cruz Pedro E. (Center for Translational Research in Neurodegenerative Disease, College of Medicine, University of Florida, Gainesville, USA) ,  Golde Todd E. (Department of Neuroscience, College of Medicine, University of Florida, Gainesville, USA) ,  Golde Todd E. (Center for Translational Research in Neurodegenerative Disease, College of Medicine, University of Florida, Gainesville, USA) ,  Golde Todd E. (McKnight Brain Institute, College of Medicine, University of Florida, Gainesville, USA)
資料名： Molecular Neurodegeneration (Web)  (Molecular Neurodegeneration (Web))
巻： 15  号： 1  ページ： 1-16  発行年： 2020年 
JST資料番号： U7339A  ISSN： 1750-1326  資料種別： 逐次刊行物 (A)
記事区分： 原著論文  発行国： イギリス (GBR)  言語： 英語 (EN)

抄録/ポイント： 組換えアデノ随伴ウイルス(rAAV)は神経系における遺伝子発現を操作するために神経科学分野で広く使用されている。しかし,rAAVベクターの使用の限界は,それらを生産するために必要な時間と費用である。この制限を克服するため,HEK293T細胞のスケーラブルPEIトランスフェクション後に培地に分泌される未精製rAAVベクターが精製rAAVの内に存在するかどうかを評価した。30の異なる野生型と変異体カプシドにrAAV2-EGFPベクターをパッケージし,その後分泌rAAVを含む培地を収集した。各rAAVベクターのゲノム力価を評価し,初代混合神経膠細胞(PNGC),器官型脳スライス培養(BSCs)およびマウス脳を形質導入する各未精製ウイルスの能力を評価した。30の異なるカプシドにパッケージされたrAAV2-EGFPベクターの平均ゲノム力価において,rAAV2/5-EGFPに対する低いΔΨ4.7×1010ベクターゲノム(vg)/mLから,rAAV2/8-EGFPのカプシド変異体に対するΔΨ2.0×1012vg/mLの高いΔΨ2.0x1012vg/mLの範囲で,ΔΨ40倍の広い変動があった。PNGC研究では,評価した30カプシド間で広範囲の形質導入効率が観察され,rAAV2/6-EGFPベクターは最高の全形質導入効率を示した。BSC研究では,野生型カプシドベクターrAAV2/6,2/8および2/9,およびrAAV2/1,2/6および2/8のカプシド変異体による強固な形質導入を観察した。in vivo体細胞脳転移(SBT)研究では,選択変異体カプシドでパッケージした未精製rAAV2-EGFPベクターを含む培地の脳室内注入が,非トランスジェニックマウスの海馬と前脳で豊富なEGFP陽性ニューロンと星状細胞を生じることを見出した。未精製rAAVはin vitroおよびin vivoの両方で溶解物精製rAAVに等価レベルで導入遺伝子を発現することを示した。また,未精製rAAVは,in vivoでのBSCおよび神経炎症におけるタウ病理を駆動するのに十分であり,精製rAAVを用いた以前の研究を再現することを示した。培地に分泌される未精製rAAVベクターは,in vitroおよびin vivoで脳細胞を効率よく形質導入し,遺伝子発現を操作するための費用対効果の高い方法を提供する。未精製ウイルスの使用は,探索研究のコストを大きく減少させ,標準実験室使用に対するrAAVベクターの有用性を更に増加させる。Copyright 2020 The Author(s) All rights reserved. Translated from English into Japanese by JST.【JST・京大機械翻訳】

シソーラス用語： ニューロン ,  形質導入 ,  海馬 ,  ゲノム ,  カプシド ,  *遺伝子発現 ,  トランスフェクション ,  野生型 ,  ベクター ,  病理 ,  トランスジェニックマウス ,  in vitro実験 ,  アデノ随伴ウイルス ,  星状細胞
準シソーラス用語： EGFP , 【Automatic Indexing@JST】

著者キーワード (5件)： アデノ随伴ウイルス ,  カプシド偽型 ,  AAV生産 ,  遺伝子デリバリー ,  中枢神経系

分類 (1件)： 遺伝子操作  (EC02050B)

引用文献 (48件)：

• Proc Natl Acad Sci U S A; Nucleic acid from an adeno-associated virus: chemical and physical studies; JA Rose, MD Hoggan, AJ Shatkin; 56; 1; 1966; 86-92; 10.1073/pnas.56.1.86; citation_id=CR1
• Proc Natl Acad Sci U S A; Studies of small DNA viruses found in various adenovirus preparations: physical, biological, and immunological characteristics; MD Hoggan, NR Blacklow, WP Rowe; 55; 6; 1966; 1467-1474; 10.1073/pnas.55.6.1467; citation_id=CR2
• Science; ADENOVIRUS-ASSOCIATED DEFECTIVE VIRUS PARTICLES; RW Atchison, BC Casto, WM Hammon; 149; 3685; 1965; 754-756; 10.1126/science.149.3685.754; citation_id=CR3
• J Virol; Nucleotide sequence of the inverted terminal repetition in adeno-associated virus DNA; E Lusby, KH Fife, KI Berns; 34; 2; 1980; 402-409; 10.1128/JVI.34.2.402-409.1980; citation_id=CR4
• J Virol; Physical map and strand polarity of specific fragments of adenovirus-associated virus DNA produced by endonuclease R-EcoRI; BJ Carter, G Khoury, DT Denhardt; 16; 3; 1975; 559-568; 10.1128/JVI.16.3.559-568.1975; citation_id=CR5

タイトルに関連する用語 (5件)： 遺伝子発現 ,  費用効果 ,  精製 ,  分泌 ,  rAAV