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J-GLOBAL ID：202002245919504752   整理番号：20A0155413

組換ヒト骨形成蛋白質-2遺伝子工学株の構築及び蛋白質再精製【JST・京大機械翻訳】

Construction of Genetic Engineering Strains of rhBMP-2 and Its Purification and Renaturation

著者 (8件)： Zhang Xiuhua (山東省薬学科学院 山東省生物薬物重点実験室 山東省多糖類薬物工程実験室 多糖類薬物発酵与精制国家地方聯合工程実験室 博士后科研工作站,山東 済南,250101) ,  Liu Fei (山東省薬学科学院 山東省生物薬物重点実験室 山東省多糖類薬物工程実験室 多糖類薬物発酵与精制国家地方聯合工程実験室 博士后科研工作站,山東 済南 250101;山東大学 薬学院,山東 済南 250101) ,  Liu Yingmei (山東省薬学科学院 山東省生物薬物重点実験室 山東省多糖類薬物工程実験室 多糖類薬物発酵与精制国家地方聯合工程実験室 博士后科研工作站,山東 済南,250101) ,  Chen Mian (山東省薬学科学院 山東省生物薬物重点実験室 山東省多糖類薬物工程実験室 多糖類薬物発酵与精制国家地方聯合工程実験室 博士后科研工作站,山東 済南,250101) ,  Liu Xia (山東省薬学科学院 山東省生物薬物重点実験室 山東省多糖類薬物工程実験室 多糖類薬物発酵与精制国家地方聯合工程実験室 博士后科研工作站,山東 済南,250101) ,  Liu Jinming (浙江賽霊特医薬科技有限公司,浙江 杭州,311100) ,  Ling Peixue (山東省薬学科学院 山東省生物薬物重点実験室 山東省多糖類薬物工程実験室 多糖類薬物発酵与精制国家地方聯合工程実験室 博士后科研工作站,山東 済南 250101;山東大学 薬学院,山東 済南 250101) ,  Wang Fengshan (山東大学 薬学院,山東 済南,250101)
資料名： Shipin yu Yaopin  (Shipin yu Yaopin)
巻： 21  号： 5  ページ： 337-342  発行年： 2019年 
JST資料番号： C4101A  ISSN： 1672-979X  資料種別： 逐次刊行物 (A)
記事区分： 原著論文  発行国： 中国 (CHN)  言語： 中国語 (ZH)

抄録/ポイント： 【目的】ヒト骨形成蛋白質2(hBMP-2)の高効率発現のための遺伝子工学株を構築し,そして,生物活性を有するrhBMP-2を精製して,精製する。【方法】hBMP-2遺伝子フラグメントを遺伝子工学によってpET-28a(+)プラスミドベクターに接続し,大腸菌発現系を構築した。細菌発酵後、超音波破砕により封入体を収集し、封入体を溶解後、希釈複合性法により複合性、SDS-PAGEで復性状況を測定し、HiTrapHeparinHPで精製し、C2C12細胞検査活性を測定した。【結果】rhBMP-2は,大腸菌において不活性封入体として発現し,1L発酵槽の高密度発酵rhBMP-2封入体は,20g/Lの湿重量に達した。希釈法を採用して、タンパクの複性率は40%より大きく、アフィニティークロマトグラフィーによる精製後、二量体蛋白の純度は95%以上に達し、しかもC2C12細胞のアルカリホスファターゼの発現を誘導し、市販品と同じ細胞活性を有する。【結語】rhBMP-2の高効率発現のための遺伝子工学菌株の構築に成功し,封入体を精製する必要がなく,精製方法は簡単で,工業生産コストを大いに減少させる。Data from Wanfang. Translated by JST.【JST・京大機械翻訳】

シソーラス用語： *骨形成因子 ,  *タンパク質 ,  発酵槽 ,  *遺伝子 ,  *ヒト ,  純度 ,  希釈 ,  封入体 ,  SDS-PAGE ,  大腸菌 ,  アルカリ性ホスファターゼ ,  溶解 ,  発酵 ,  アフィニティークロマトグラフィー ,  生物活性

分類 (2件)： 遺伝子操作  (EC02050B) ,  遺伝子発現  (EC02040Q)

タイトルに関連する用語 (8件)： 組換 ,  ヒト ,  骨形成蛋白質 ,  遺伝子工学 ,  株 ,  構築 ,  蛋白質 ,  精製