抄録/ポイント:
抄録/ポイント
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目的:3-メチルアデニン(3-Methyladenine,3-MA)を用いて、オートファジー後の低酸素/再酸素化心筋細胞アポトーシス及び関連アポトーシスタンパク質及びオートファジータンパク発現への影響を検討する。方法:48匹の生後24時間以内のC57BL/6Jマウスを3群にランダムに分けた:対照群(C)、低酸素/再酸素化群(H/R)、3-MA連合と低酸素/再酸素化群(3-MA+H/R)、各群16匹。トリプシンとII型コラゲナーゼを用いて心筋細胞を分離し、7日間培養後、正常群を培養し、H/R群は無血清、無糖DMEM培地を交換し、低酸素培養箱(37°C、1%O2、5%CO2、94%N2)3h。完全培地を交換し、正常培養箱(37°C、21%O2、5%CO2)を6h.3-MA+H/R群に入れ、低酸素/再酸素化の3時間後に3-MAを添加し、最終濃度を10mMとし、その後、H/R群を処理した。培地中の乳酸脱水素酵素(LDH)の含有量、フローサイトメトリによる細胞アポトーシスを測定し、及びwestern-blotにてアポトーシス関連卵Bcl-2、Cytc、及びオートファジー関連蛋白Beclin-1タンパク質の発現を測定した。結果;(1)H/R群、3-MA+H/R群の心筋細胞培養液中のLDH含量とアポトーシス率は顕著に増加し、対照群の心筋細胞と明らかな差があり(P<0.01)、3-MA+H/R群のLDH含量とアポトーシス率はH/R群より明らかに増加した。統計的有意差が認められた(P<0.01)。(2)正常対照群と比較して,H/R群,3-MA+H/R群のBcl-2,Beclin-1蛋白質は減少し(P<0.01),Cytc蛋白質発現は増加したが(P<0.01),3-MA+H/R群ではBcl-2,Beclin-1,Bcl-2,およびBeclin-1の発現は増加した(P<0.01)。Beclin-1蛋白質発現は,H/R群(P<0.001)と比較して有意に減少し,Cytc蛋白質発現は有意に増加した(P<0.01)。結論:オートファジーの抑制は,低酸素/再酸素化心筋細胞損傷を悪化させ,Bcl-2,Beclin-1発現を減少させ,Cytc発現を増加させ,心筋細胞のアポトーシスを促進する。低酸素/再酸素化心筋細胞のオートファジーレベルを適切に高めることは心筋細胞に対して保護作用を発揮する可能性がある。Data from Wanfang. Translated by JST.【JST・京大機械翻訳】