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J-GLOBAL ID:202002249042913903   整理番号:20A0530568

ウシ前脂肪細胞における転写因子NRF1とSmad3を介するTRC1遺伝子のバイオインフォマティクス解析と転写調節【JST・京大機械翻訳】

Bioinformatics analysis and transcriptional regulation of TORC1 gene through transcription factors NRF1 and Smad3 in bovine preadipocytes
著者 (11件):
資料名:
巻: 112  号:ページ: 1575-1587  発行年: 2020年 
JST資料番号: T0422A  ISSN: 0888-7543  資料種別: 逐次刊行物 (A)
記事区分: 原著論文  発行国: オランダ (NLD)  言語: 英語 (EN)
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筋肉内脂肪は肉質を定義する重要な因子である。しかしながら,他の3つの脂肪蓄積(皮下,内臓,および筋肉間脂肪)を増加させることなく,その沈着を強化することは,動物科学および肉産業に対する挑戦である。TORC1は脂肪生成の重要な調節因子であり,ウシ筋肉内前脂肪細胞におけるその調節は研究されていない。TORC1は,脂質生成の重要な調節因子であるcAMPの転写を調節する結合蛋白質をコードする遺伝子ファミリーのメンバーである。本研究では,TORC1遺伝子の発現と細胞内局在をウシ前脂肪細胞で分析した。バイオインフォマティクスツールを適用して,TORC1を特性化した。ウシTORC1遺伝子調節の分子機構を調べるために,5′UTR調節領域の1008bpをルシフェラーゼレポーターベクターにクローン化した。異なるフラグメントを,TORC1プロモーターの5′UTR一方向欠失を用いて増幅した。部位特異的変異,二重ルシフェラーゼレポーターアッセイ,RNAi干渉およびDNA-蛋白質相互作用(EMSA)を用いて,ウシ前脂肪細胞におけるTORC1遺伝子の調節におけるSmad3およびNRF1の調節的役割を検証した。TORC1遺伝子のコアプロモーター領域は,転写開始部位の上流で-410から-155bpの位置で同定された。異なるベクターを5′UTRフランキング領域の連続的欠失とsiRNAまたはshRNAによる部位指向突然変異と転写干渉との組合せにより構築し,NRF1とSmad3の2つの転写因子がTORC1遺伝子のプロモーターに抑制因子であることを見出した。これらの知見は,ウシ脂肪細胞の核抽出物内の電気泳動移動度シフト分析(EMSA)によりさらに確認された。転写開始部位の-410から-155bp上流に及ぶTORC1遺伝子のコアプロモーター領域を本研究において特定し,この情報はウシにおける筋肉内脂肪の改善の機会を提供するであろう。Copyright 2020 Elsevier B.V., Amsterdam. All rights reserved. Translated from English into Japanese by JST.【JST・京大機械翻訳】
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分類 (1件):
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遺伝子の構造と化学 

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