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J-GLOBAL ID：202002252084432340   整理番号：20A0200934

Rhodococcus ruber THに対するCRISPR/Cas9に基づくゲノム編集システム【JST・京大機械翻訳】

A CRISPR/Cas9-based genome editing system for Rhodococcus ruber TH

著者 (11件)： Liang Youxiang (Department of Chemical Engineering, Tsinghua University, Beijing, 100084, China) ,  Liang Youxiang (Key Laboratory of Industrial Biocatalysis, Tsinghua University, Ministry of Education, Beijing, 100084, China) ,  Jiao Song (Department of Chemical Engineering, Tsinghua University, Beijing, 100084, China) ,  Jiao Song (Key Laboratory of Industrial Biocatalysis, Tsinghua University, Ministry of Education, Beijing, 100084, China) ,  Wang Miaomiao (Department of Chemical Engineering, Tsinghua University, Beijing, 100084, China) ,  Wang Miaomiao (Key Laboratory of Industrial Biocatalysis, Tsinghua University, Ministry of Education, Beijing, 100084, China) ,  Yu Huimin (Department of Chemical Engineering, Tsinghua University, Beijing, 100084, China) ,  Yu Huimin (Key Laboratory of Industrial Biocatalysis, Tsinghua University, Ministry of Education, Beijing, 100084, China) ,  Yu Huimin (Center for Synthetic and Systems Biology, Tsinghua University, Beijing, 100084, China) ,  Shen Zhongyao (Department of Chemical Engineering, Tsinghua University, Beijing, 100084, China) ,  Shen Zhongyao (Key Laboratory of Industrial Biocatalysis, Tsinghua University, Ministry of Education, Beijing, 100084, China)
資料名： Metabolic Engineering  (Metabolic Engineering)
巻： 57  ページ： 13-22  発行年： 2020年 
JST資料番号： W1646A  ISSN： 1096-7176  CODEN： MEENFM  資料種別： 逐次刊行物 (A)
記事区分： 原著論文  発行国： オランダ (NLD)  言語： 英語 (EN)

抄録/ポイント： Rhodococcus spp.は,強い適応能力と多様な代謝活性を有する有機溶媒耐性株であり,したがって,生物変換,生合成およびバイオレメディエーションにおいて広く利用されている。しかしながら,ゲノムの高いGC含量(~70%)により,低い形質転換と組換え効率と共に,Rhodococcusの効率的なゲノム編集は困難なままである。本研究では,R.ruberに対するCRISPR/Cas9に基づくゲノム編集システムの確立を初めて報告する。制限-修飾システムのバイパスにより,R.ruberの形質転換効率は89倍増強され,突然変異体のスクリーニングのための十分なコロニーを得ることを可能にした。一対のバクテリオファージ組換え体,Che9c60およびChe9c61を導入することにより,編集効率は1%から75%に改善された。遺伝子欠失,挿入および突然変異の高い効率を有するCRISPR/Cas9媒介三重プラスミド組換えシステムを開発した。最後に,この新しいゲノム編集法を,アクリルアミドのバイオ生産のためのR.ruberの技術者に適用することに成功した。安定突然変異体を持つ天然ニトリルヒドラターゼ遺伝子の産生関連遺伝子の欠失とin situ補助により,遺伝子操作株R.ruber THYが副産物形成の減少と触媒安定性の増強により得られた。野生型R.ruber THの利用と比較して,バイオ触媒としてのR.ruber THYの利用は,アクリルアミド濃度を405g/Lから500g/Lに増加させ,副産物濃度を2.54g/Lから0.5g/Lに減少させ,細胞数を1バッチから4バッチにリサイクルできた。Copyright 2020 Elsevier B.V., Amsterdam. All rights reserved. Translated from English into Japanese by JST.【JST・京大機械翻訳】

シソーラス用語： *Rhodococcus ,  遺伝子欠損 ,  バイオレメディエーション ,  遺伝子 ,  *編集 ,  野生型 ,  突然変異 ,  *ゲノム ,  コロニー ,  生体内変化 ,  バイオ触媒 ,  プラスミド ,  遺伝子操作 ,  バクテリオファージ ,  生合成

著者キーワード (6件)： Rhodococcus ,  CRISPR/Cas9 ,  ゲノム編集 ,  制限修飾システム ,  リコンビナーゼ ,  アクリルアミドのバイオ生産

分類 (1件)： 代謝と栄養  (EG03054K)

タイトルに関連する用語 (5件)： Rhodococcus ,  Th ,  CRISPR ,  Cas9 ,  ゲノム編集