抄録/ポイント:
抄録/ポイント
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【目的】卵巣癌細胞の遊走と浸潤に及ぼすマイクロRNA-145(miR-145)の影響を評価する。方法:上皮性卵巣癌細胞株SKOV3及び3AOを選択し、miR-145を過剰発現した後、qRT-PCRにてトランスフェクション前後の細胞株miR-145の発現を測定し、Transwellチャンバー実験にてトランスフェクション前後の細胞遊走及び浸潤能力を測定した。バイオインフォマティクス法を用いて、miR-145標的遺伝子zeb-2を特異的に予測し、ダブルルシフェラーゼレポーター実験により検証し、また、zeb-2をノックダウンした後、細胞移動能力を測定した。【結果】miR-145の過剰発現後,SKOV3(t=10.752,P=0.000;t=5.617,P=0.005)および3AO細胞(t=10.111,P=0.001);t=21.746,P=0.000)の遷移と増殖能力は明らかに低下した。二重ルシフェラーゼレポーターアッセイの結果,miR-145micとWT3’UTR発現ベクターを共形質移入した細胞の相対ルシフェラーゼ活性は,共トランスフェクションしたmiccontrolとWT3’UTR発現ベクターの細胞(SKOV3)より著しく低かった。t=4.572,P=0.010;3AO;t=3.528,P=0.024)。miR-145micとMUT3’UTR発現ベクターを共形質移入した細胞の相対ルシフェラーゼ活性は,共形質移入したmiccontrolとMUT3’UTR発現ベクターとの有意差を示さなかった(SKOV3:0.05)。t=0.227,P=0.831;3AO;t=0.040,P=0.970)。miR-14548hの過剰発現後,リアルタイム定量的PCRは,陰性対照と比較して,SKOV3(t=1.490,P=0.211)および3AO(t=0.114,P=0)が,それぞれ,2つの群(t=1.490,P=0.211)および3AO(t=0.114,P=0)で検出されることを示した。914)におけるzeb-2mRNA発現に有意差はなかった。miR-14572hの過剰発現後,ウエスタンブロットは,陰性対照と比較して,SKOV3(t=3.769,P=0.020)および3AO細胞(t=4.452,P=0)を示した。011)におけるzeb-2蛋白質の発現レベルは,明らかに減少した。ウエスタンブロット法の結果は,SKOV3(t=4.660,P=0.010)と3AO細胞(t=4.594,P=0)が,トランスフェクションしたzeb-2siRNAの72時間トランスフェクションの後,ウエスタンブロットによって検出されたことを示した(t=4.660,P=0.010)。010)におけるzeb-2蛋白質の発現レベルは,明らかに下方制御された。Transwell小室検査の結果,SKOV3(t=18.655,P=0.000;t=18.026,P=0.000)および3AO(t=5.500,P=0.005);t=8.780,P=0.001)細胞の移動と浸潤能力は明らかに低下した。【結語】miR-145は,卵巣癌細胞の遊走と浸潤を抑制するために,zeb-2のターゲッティングを阻害する可能性がある。Data from Wanfang. Translated by JST.【JST・京大機械翻訳】