抄録/ポイント：
抄録/ポイント
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目的:シュウ酸カルシウム結石患者の腎乳頭におけるニコチンアミドアデニンジヌクレオチドリン酸オキシダーゼサブユニット4(Nox4)の発現及びその作用機序を検討する。方法:GEOデータベースでRandallカルシウムスポットチップを検索し,GSE73680のサンプルで記述し,サンプルを無結石対照群(6例)とシュウ酸カルシウム結石群(24例)に分けた。正常腎臓乳頭とシュウ酸カルシウム腎結石患者の腎乳頭組織中のNox4と骨形成関連蛋白遺伝子の発現差異をGEO2Rで分析した。高カルシウム処理ラット尿細管上皮細胞(NRK-52E)を用い、免疫蛍光法(IF)にてNox4の発現を測定し、ウエスタンブロット法(Westernblot)にてNox4と骨形態形成タンパク質(BMP-2)の発現を測定した。酸化ストレスマーカーのマロンジアルデヒド(MDA)とスーパーオキシドジスムターゼ(SOD)活性を化学ルミネセンス法で測定した。群間の比較はt検定を用いた。結果;GEO2R分析では、Nox4はシュウ酸カルシウム結石グループで発現が増加し、差異発現倍数は0.726倍(t=2.040、P<0.05)で、マトリックスGla蛋白(MGP)はシュウ酸カルシウム結石グループで発現が低下し、差異発現倍数は-1であった。228倍(t=-1.230、P>0.05)、オステオカルシン(OCN)はシュウ酸カルシウム結石グループで発現が増加し、差異発現倍数は0.439倍(t=1.241、P>0.05)で、オステオプロテゲリン(OPG)はシュウ酸カルシウム結石グループで発現が上昇した。差次的発現倍数は0.639倍(t=0.888,P>0.05)で,オステオポンチン(OPN)はシュウ酸カルシウム結石群で増加し,差次的発現倍数は1.664倍(t=1.171,P>0.05)であった。免疫蛍光検査の結果,高カルシウム処理NRK-52E細胞におけるNox4の平均蛍光吸光度は,対照群(0.651,1.446,1.480,t=8.023,6.477,P<0.05)より有意に高かった。ウエスタンブロットは,NRK-52E細胞におけるNox4の発現が,未処理の正常対照と比較して,有意に増加した(0.426,0.594,0.734,t=28.954,53.082,P<0.01)。BMP-2発現も増加した(0.242,0.472,0.676,t=12.765,14.257,P<0.01)。さらに,NRK-52E細胞を高カルシウムで処理すると,MDA含量(0.188,0.390,0.650,t=2.679,6.686,P<0.05)が増加し,SOD活性は40.630,38.060,36.230減少した。t=4.079,10.390,P<0.05)。結論:Nox4は腎結石患者の腎乳頭で発現が明らかに増加し、Nox4が介在する酸化ストレスは腎結石の形成過程において重要な役割を果たしているかもしれない。Data from Wanfang. Translated by JST.【JST・京大機械翻訳】
