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J-GLOBAL ID：202002259095326581   整理番号：20A0234528

CRISPR/Cas9によるIL-12p35ノックアウトラットC6細胞株発現研究【JST・京大機械翻訳】

Expression of IL-12 p35 knock out rat C6 cell line by CRISPR/Cas9 technology

著者 (6件)： Sun Jin (厦門大学附属中山医院神経外科,厦門,361004) ,  Zhang Junqing (厦門大学附属中山医院神経外科,厦門,361004) ,  Huang Yanlin (厦門大学附属中山医院神経外科,厦門,361004) ,  Yang Fangyu (厦門大学附属中山医院神経外科,厦門,361004) ,  Dong Guijiang (厦門大学附属中山医院神経外科,厦門,361004) ,  Tian Xinhua (厦門大学附属中山医院神経外科,厦門,361004)
資料名： Zhongguo Mianyixue Zazhi  (Zhongguo Mianyixue Zazhi)
巻： 35  号： 20  ページ： 2452-2456  発行年： 2019年 
JST資料番号： C2268A  ISSN： 1000-484X  CODEN： ZMZAEE  資料種別： 逐次刊行物 (A)
記事区分： 原著論文  発行国： 中国 (CHN)  言語： 中国語 (ZH)

抄録/ポイント： 目的:CRISPR/Cas9技術を用いてC6細胞株のIL-12p35遺伝子をノックアウトし、IL-12p35遺伝子安定ノックアウト細胞株を構築する。方法;Lenti-sgRNA-EGFPプラスミドCRISPR/Cas9系統のCas9エンドヌクレアーゼ遺伝子を構築し,C6細胞をレンチウイルスに感染させた後にMTT[3-(4,5-Dimeth-ylthiazol-2-yl)-2を行った。5-diphenyltetrazoliumbromideの検査及びPI-FACS(FacialActionCodingSystem)細胞周期測定。結果:IL-12p35遺伝子のKO1、KO2、KO3の3つの標的に対して、レンチウイルスのトランスフェクションを行い、トランスフェクション効率は80%以上であった。標的活性は,酵素消化の前後に下方制御され,C6細胞における標的有効性は,ウエスタンブロットによって確認された。MTTアッセイの結果,IL-12p35遺伝子ノックアウト後5日目で細胞増殖倍数が有意に低下した。IL-12p35遺伝子ノックアウトは細胞周期G1期、G2/M期に顕著な影響を及ぼす。結論:本研究はIL-12p35遺伝子のCRISPR/Cas9ノックアウトシステムを構築し、安定したIL-12p35遺伝子ノックアウト細胞株を獲得し、後期IL-12p35と神経膠腫細胞の発生、発展メカニズムの研究に基礎を提供した。Data from Wanfang. Translated by JST.【JST・京大機械翻訳】

シソーラス用語： 細胞周期 ,  有効性 ,  エンドヌクレアーゼ ,  ウェスタンブロット法 ,  プラスミド ,  酵素的分解 ,  トランスフェクション ,  ダウンレギュレーション ,  神経膠腫 ,  レンチウイルス ,  細胞増殖 ,  *遺伝子
準シソーラス用語： G1期 ,  *細胞株 ,  *Cas9 , 【Automatic Indexing@JST】

分類 (5件)： 遺伝子発現  (EC02040Q) ,  生物学的機能  (EB03040U) ,  ウイルスの生化学  (EG04030F) ,  サイトカイン  (EB08090G) ,  細胞生理一般  (EF02010S)

タイトルに関連する用語 (7件)： CRISPR ,  Cas9 ,  ノックアウトラット ,  C6 ,  細胞株 ,  発現 ,  研究