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J-GLOBAL ID:202002262208016473   整理番号:20A0694188

ブタmiR-199a-3pによるmTOR遺伝子発現の調節【JST・京大機械翻訳】

Regulation of Gene Expression of mTOR by miR-199a-3p in Pigs
著者 (4件):
資料名:
巻: 40  号: 12  ページ: 1-5  発行年: 2019年 
JST資料番号: C3581A  ISSN: 1007-5038  資料種別: 逐次刊行物 (A)
記事区分: 原著論文  発行国: 中国 (CHN)  言語: 中国語 (ZH)
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miR-199a-3pとmTOR-3’UTRの結合部位をバイオインフォマティクスにより予測し,ブタのmTOR-3’UTRと突然変異フラグメントを二重ルシフェラーゼベクターにクローニングした。野生型(psiCHECK-2-W-mTOR-3’-UTR)と変異型(psi-CHECK-2-M-mTOR-3’-UTR)の二重ルシフェラーゼレポータープラスミドを構築した。PK-15細胞を,miR-199a-3pmics,nega-tivecontrolおよびmTOR-3’-UTR野生型/突然変異二重ルシフェラーゼレポーターベクターに形質移入し,ルシフェラーゼ活性を二重ルシフェラーゼキットで検出した。mTOR遺伝子のmRNAと蛋白質発現は,それぞれRT-qPCRとウエスタンブロットによって検出した。結果は,野生型と変異型二重ルシフェラーゼレポータープラスミドとmiR-199a-3pmicをPK-15細胞に共形質移入し,野生型レポータープラスミドで発現されたルシフェラーゼ活性が,陰性対照群(P<0.05)のものより著しく低いことを示した。miR-199a-3pmicsのトランスフェクションは,mRNAと蛋白質の発現を有意に下方制御し(P<0.05),miR-199a-3pInhibitor群とInhibitor-NC群をトランスフェクションした。mTOR遺伝子の蛋白質発現に有意差はなかった(P>0.05)。ブタの野生型及び突然変異型mTOR-3’-UTR二重ルシフェラーゼレポータープラスミドの構築に成功し、二重ルシフェラーゼアッセイ、RT-qPCR及びWesternblotにより、miR-199a-3pとブタmTOR-3’-UTRの標的調節関係を確認した。Data from Wanfang. Translated by JST.【JST・京大機械翻訳】
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, 【Automatic Indexing@JST】
分類 (2件):
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遺伝子発現  ,  分子遺伝学一般 
タイトルに関連する用語 (4件):
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