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J-GLOBAL ID：202002264900758798   整理番号：20A1136688

アルファルファMsSQE1のクローニング及びサポニン合成の機能分析【JST・京大機械翻訳】

Cloning MsSQE1 from Alfalfa and Functional Analysis in Saponin Synthesis

著者 (8件)： Kang Junmei (中国農業科学院北京畜牧獣医研究所,北京,100193) ,  Zhang Qiaoyan (中国農業科学院北京畜牧獣医研究所,北京,100193) ,  Jiang Xu (中国農業科学院北京畜牧獣医研究所,北京,100193) ,  Wang Zhen (中国農業科学院北京畜牧獣医研究所,北京,100193) ,  Zhang Tiejun (中国農業科学院北京畜牧獣医研究所,北京,100193) ,  Long Ruicai (中国農業科学院北京畜牧獣医研究所,北京,100193) ,  Cui Huiting (中国農業科学院北京畜牧獣医研究所,北京,100193) ,  Yang Qingchuan (中国農業科学院北京畜牧獣医研究所,北京,100193)
資料名： Zhongguo Nongye Kexue  (Zhongguo Nongye Kexue)
巻： 53  号： 2  ページ： 247-260  発行年： 2020年 
JST資料番号： W1459A  ISSN： 0578-1752  CODEN： CKNYAR  資料種別： 逐次刊行物 (A)
記事区分： 原著論文  発行国： 中国 (CHN)  言語： 中国語 (ZH)

抄録/ポイント： 【目的】スクアレンオキシドレダクターゼ(SQE)は,アルファルファサポニンの合成経路における律速酵素であり,アルファルファサポニンの合成と密接に関係する。アルファルファにおけるスクアレンオキシドレダクターゼ(MsSQE1)遺伝子のクローニングおよびアルファルファにおける過剰発現により,サメクエンエポキシ酵素によるサポニン合成の作用機序を検討した。【方法】アルファルファMsSQE1の相同クローンを,モデル植物ハマゴヤシのサメのエポキシ酵素遺伝子配列によって設計した。MsSQE1のバイオインフォマティクス分析を行い、遺伝子銃衝撃技術を通じて、MsSQE1をタマネギ表皮に一過性に発現させ、亜細胞定位を行った。qRT-PCR法を用いて,根,茎,葉における遺伝子発現,UV照射,ABAおよびGA3発現パターンを分析した。ジャスモン酸メチル(MeJA)の誘導下で、MsSQE1の転写レベル、およびアルファルファサポニンの含有量に対する影響を分析した。根癌アグロバクテリウム形質転換系を用いて、MsSQE1を過剰発現する陽性トランスジェニック植物を獲得し、遺伝子組換え植物のサポニン含有量を測定した。[結果]MsSQE1のcDNA配列をクローニングし、オープンリーディングフレームは1578bpで、525個のアミノ酸をコードし、等電点は8.59であった。ホモロジー比較分析では、そのアミノ酸配列とタルウマゴヤシのSQE1アミノ酸配列の相同性は98.6%であり、シロイヌナズナとの相同性は80%であった。亜細胞定位により、MsSQE1は細胞膜に定位する可能性が示された。組織特異的発現分析により、MsSQE1は葉の中で発現量が最も高く、茎中次、根中の発現量が最も低いことが分かった。紫外線照射、ABAとGA3の誘導発現により、紫外放射誘導24h、葉中の発現量が最も高いことが分かった。GA3(50μmol・L-1)とABA(100μmol・L-1)で処理すると、いずれも8h葉で発現量が最も高い。MeJA処理はMsSQE1発現量の上昇を誘導でき、アルファルファの総サポニン含有量もMsSQE1発現のアップレギュレーションに伴い増加した。MsSQE1遺伝子組み換えアルファルファとトランスデューサアルファルファ系統を過剰発現すると、MsSQE1の発現レベルと総サポニン含有量はいずれも上昇し、そのうちMsSQE1の発現レベルは対照の3.11-9.45倍であり、総サポニン含量は対照より14.26%-28高かった。05%は、MsSQE1がアルファルファサポニンの合成経路における重要な調節酵素であることを示唆する。【結語】MsSQE1をマメ科牧草アルファルファからクローニングし,機能分析を行った。アルファルファ中のMsSQE1の過剰発現はアルファルファの総サポニン含有量を増加させ、MsSQE1の発現がアルファルファサポニンの生合成に影響し、サポニンの合成に重要な調節作用がある可能性が示唆された。Data from Wanfang. Translated by JST.【JST・京大機械翻訳】

シソーラス用語： 酵素 ,  生合成 ,  アミノ酸 ,  アミノ酸配列 ,  遺伝子 ,  *サポニン ,  Agrobacterium ,  *アルファルファ ,  遺伝子発現 ,  相同性 ,  アップレギュレーション ,  トランスジェニック植物 ,  Arabidopsis thaliana
準シソーラス用語： *クローニング ,  過剰発現 , 【Automatic Indexing@JST】

分類 (1件)： 遺伝子発現  (EC02040Q)

タイトルに関連する用語 (4件)： アルファルファ ,  クローニング ,  サポニン ,  機能分析