抄録/ポイント：
抄録/ポイント
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感染を引き起こすABSTRACTは,2倍体ゲノムを持ち,古典的減数分裂を受けない。したがって,クラスター化規則的空間間短パリンドローム反復Cas9(CRISPR-Cas9)遺伝子編集システムの適用は,遺伝子破壊の発生および特異的多型の導入を大いに促進した。しかし,CRISPR法は,全てのCandida種に対してまだ利用できない。ここでは,自律的に複製するプラスミドを用いるCandida parapsilosisにおける以前に開発したCRISPRシステムの適応について述べた。ガイドRNAは単一クローニング段階で導入され,tRNAとリボザイム間の切断により放出される。プラスミドはまた,CAS9と選択可能なノスロリシンSAT1マーカーを含む。それは,C.parapsilosis,C.orthopsilosis,およびC.metapsilosisのマーカーレス編集に使用できる。また,CRISPRは分子バーコードを導入し,野生型配列を編集株に再導入するために容易に使用できることを示した。ヘテロ接合変異は,多型とCas9切断部位間の距離の注意深い選択または同時に2つの異なる修復鋳型を提供することにより発生できる。さらに,Candida tropicalisにおけるCRISPR-Cas9編集のための異なる自律的複製プラスミドを構築した。エディティングは複数のC.tropicalis分離株で容易に行うことができることを示した。非相同末端結合(NHEJ)修復は,C.metapsilosisとC.tropicalisにおいて高レベルで起こる。IMPORTANCE Candida種は世界中の感染の主な原因である。感染に関連する種は地理的位置および患者集団により変化する。Candida tropicalisによる感染は南アメリカとアジアで特に一般的であり,Candida parapsilosis感染は非常に若年で一般的である。これらの種のゲノムを操作するための分子的方法は,まだ不足している。姉妹種Candida orthopsilosisとCandida metapsilosisを含むC.parapsilosis種群に適用できる簡単で効率的なCRISPRに基づく遺伝子編集システムについて述べた。また,C.tropicalisにおける遺伝子編集のための分離システムを構築した。Please refer to the publisher for the copyright holders. Translated from English into Japanese by JST.【JST・京大機械翻訳】
