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J-GLOBAL ID：202002269818190758   整理番号：20A0805846

プライマーの合理的設計によるタンデム多量体としてのオピオイドペンタペプチドの組換え生産【JST・京大機械翻訳】

Recombinant Production of Opiorphin Pentapeptide as Tandem Multimers Through Rational Design of Primers

著者 (1件)： Guler H. I. (Karadeniz Technical University, Faculty of Science, Department of Molecular Biology and Genetics, Trabzon, Turkey)
資料名： Applied Biochemistry and Microbiology  (Applied Biochemistry and Microbiology)
巻： 56  号： 2  ページ： 141-148  発行年： 2020年 
JST資料番号： W4043A  ISSN： 0003-6838  資料種別： 逐次刊行物 (A)
記事区分： 原著論文  発行国： ドイツ (DEU)  言語： 英語 (EN)

抄録/ポイント： ヒト唾液中に分泌されるオピエフィンは,モルヒネに類似した疼痛抑制効果を示す内因性調節因子ペンタペプチド(QRFSR)である。ここでは,Esherichia coli細胞で発現することにより,効率的にオピオーリンペプチドの縦列反復多量体を生産する戦略を報告する。発現レベルを改善し,ペンタペプチドの収率を増加させるために,opフィンの32-merタンデム配列を,pGEX-2T発現ベクターに挿入された部分相補的プライマーを用いて生成し,グルタチオントランスフェラーゼ(GST)遺伝子と融合させた。組換えタンデム多量体は,9.2mg/Lの収率でGSTカラムにより容易に捕捉され,そして,28.49kDaサイズの32量体オピオーリンポリペプチドは,CNBrとエンドプロテイナーゼAsp-Nにより単量体に切断された。約693Daの分子量を持ち,長さ5アミノ酸を含むオピオーリンポリペプチドを生成した。Bradfordアッセイにより,切断および精製した組換え型オピオーリンモノマーの量を6.2mg/Lと計算した。組換ポリペプチドの蛋白質発現と切断をSDS-PAGEとTLCにより確認した。本研究からの結果は,実験室研究および工業目的に使用するために,オピオーリンペプチドの大量生産への扉を明らかに開いた。切断可能なリンカーペプチドを有する部分的に相補的なプライマーを用いた発現ベクター戦略への全体的な遺伝子構築と直接クローニングは,多くの小ペプチドと医薬品と臨床応用のためのそれらの類似体に適用することができた。Copyright Pleiades Publishing, Inc. 2020 Translated from English into Japanese by JST.【JST・京大機械翻訳】

シソーラス用語： 分子量 ,  大量生産 ,  ヒト ,  *麻薬性鎮痛薬 ,  類似物質 ,  ポリペプチド ,  *多量体 ,  グルタチオントランスフェラーゼ ,  フィン ,  *ペプチド ,  *直列接続 ,  単量体 ,  疼痛 ,  SDS-PAGE ,  遺伝子

著者キーワード (3件)： 組換えオピオイド ,  タンデム・マルチマー ,  オピオイドペンタペプチド

分類 (2件)： 遺伝子発現  (EC02040Q) ,  遺伝子操作  (EC02050B)

タイトルに関連する用語 (5件)： プライマー ,  設計 ,  タンデム ,  多量体 ,  組換え