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J-GLOBAL ID：202002271164694029   整理番号：20A2451483

金属蛋白質の金属結合親和性を推定するためのマイクロプレートスクリーン【JST・京大機械翻訳】

A microplate screen to estimate metal-binding affinities of metalloproteins

著者 (5件)： Diep Patrick (BioZone Centre for Applied Bioscience and Bioengineering, Department of Chemical Engineering and Applied Chemistry, University of Toronto, Toronto, Ontario, Canada) ,  Mahadevan Radhakrishnan (BioZone Centre for Applied Bioscience and Bioengineering, Department of Chemical Engineering and Applied Chemistry, University of Toronto, Toronto, Ontario, Canada) ,  Mahadevan Radhakrishnan (Institute of Biomedical Engineering, University of Toronto, Toronto, Ontario, Canada) ,  Yakunin Alexander F. (BioZone Centre for Applied Bioscience and Bioengineering, Department of Chemical Engineering and Applied Chemistry, University of Toronto, Toronto, Ontario, Canada) ,  Yakunin Alexander F. (Centre for Environmental Biotechnology, School of Natural Sciences, Bangor University, Bangor, United Kingdom)
資料名： Analytical Biochemistry  (Analytical Biochemistry)
巻： 609  ページ： Null  発行年： 2020年 
JST資料番号： H0177B  ISSN： 0003-2697  資料種別： 逐次刊行物 (A)
記事区分： 原著論文  発行国： オランダ (NLD)  言語： 英語 (EN)

抄録/ポイント： ATP結合カセット(ABC)輸送体からの溶質結合蛋白質(SBPs)は,化学勾配に対する輸送化合物において,生命の全形態にわたって重要な役割を果たす。いくつかのSBPsは,ナノモルとマイクロモル親和性(K_D)で環境から金属基質を除去するように進化した。金属イオンとのこれらの金属蛋白質相互作用を徹底的に研究するための等温滴定熱量測定のような確立された技術が存在するが,それらは低スループットである。多くの金属蛋白質同族体と変異体から成る蛋白質ライブラリーと緩衝液条件と潜在的リガンドの収集のために,これらの技術のスループットは最高である。本研究では,マイクロITFQ-LTAと呼ばれる改良法を記述し,Campylobacter jejuni由来の良く特性化されたニッケル特異的SBP(Ni-BP)であるCjNikZを用いてそれを検証した。次に,マイクロITFQ-LTAが,CcSBPIIと呼ぶClostridium carboxidivorans由来の推定Ni-BPの結合プロファイルを解明するために,緩衝液とリガンドの小さな収集を通してスクリーニングできる方法を実証した。この研究により,CcSBPIIはK_Dが3桁以上の種々の金属イオンに結合することを示した。L-ヒスチジンの存在下では,CcSBPIIは2000倍以上のNi2+に結合でき,同じリガンドを与えたCjNikZよりも11.6倍タイトであった。Copyright 2020 Elsevier B.V., Amsterdam. All rights reserved. Translated from English into Japanese by JST.【JST・京大機械翻訳】

シソーラス用語： *スクリーン ,  基質 ,  *金属タンパク質 ,  *タンパク質 ,  Clostridium ,  スループット ,  *親和性 ,  溶質 ,  金属イオン ,  Campylobacter jejuni
準シソーラス用語： *結合親和性 ,  *マイクロプレート ,  蛋白質間相互作用 ,  等温滴定熱量測定 , 【Automatic Indexing@JST】

著者キーワード (5件)： 金属蛋白質 ,  溶質結合蛋白質 ,  ABCトランスポーター ,  金属結合アッセイ ,  トリプトファン消光

分類 (4件)： 有機化合物の物理分析  (CC03034A) ,  生体物質一般  (EB02010G) ,  有機化合物の各種分析  (CC08034J) ,  バイオアッセイ  (EA03060N)

タイトルに関連する用語 (3件)： 金属蛋白質 ,  結合親和性 ,  推定