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J-GLOBAL ID:202002271309905856   整理番号:20A0924647

標的制御c-SKIのmicroRNAのスクリーニング及び検証【JST・京大機械翻訳】

Screening and identification of the microRNA targeting c-SKI
著者 (5件):
資料名:
巻: 40  号:ページ: 60-66  発行年: 2020年 
JST資料番号: C2932A  ISSN: 1001-6325  資料種別: 逐次刊行物 (A)
記事区分: 原著論文  発行国: 中国 (CHN)  言語: 中国語 (ZH)
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【目的】c-SKIの標的制御と,繊維化に関連するmicroRNA(miRNA)のスクリーニングと検証を行う。方法:バイオインフォマティクス方法の予測と文献報告を合わせて、c-SKIを標的としたmiRNAsを選別し、RT-qPCRによりヒト心筋繊維芽細胞(HCFBs)の候補miRNAsとc-SKIの発現を測定し、抑制作用の最も顕著なmiRNAをスクリーニングした。c-SKI-3′-UTR野生型(c-SKI-wt)および変異型(c-SKI-mut)ベクターを構築し,それぞれmiR-155a-5p/miR-17a-5pの模倣体,および,それぞれ,miR-155a-5p/miR-17a-5pを模倣した。ヒト胚性腎上皮細胞(HEK293T)において,阻害剤と対照を同時形質移入し,ルシフェラーゼレポーター系を用いてルシフェラーゼ活性を検出した。続いて,miR-155a/miR-17a-5pmicsとinhibitorをヒト心筋線維芽細胞(HCFBs)にトランスフェクションし,各群のc-SKI発現をウエスタンブロット法で検出した。【結果】c-SKIに対するmiR-155a-5pとmiR-17a-5pの阻害は,最も有意であった(P<0.01)。2)NC群と比較すると,miR-155a-5p/miR-17a-5pmics群のルシフェラーゼ活性は有意に減少した(P<0.05)。miR-155a-5p/miR-17a-5pinhibitor群のルシフェラーゼ活性は有意に増加した(P<0.05)。3)NC群と比較して,miR-155a-5p/miR-17a-5pmics群におけるc-SKI蛋白質発現は,有意に下方制御された。miR-155a-5p/miR-17a-5pinhibitor群におけるc-SKIの発現は,有意に増加した(P<0.01)。【結語】miR-155a-5pとmiR-17a-5pは,それぞれc-SKIの3′-UTRに結合し,HCFBsにおいてc-SKIの発現を負に調節する。Data from Wanfang. Translated by JST.【JST・京大機械翻訳】
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, 【Automatic Indexing@JST】
分類 (2件):
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分子遺伝学一般  ,  遺伝子発現 
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