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J-GLOBAL ID:202002276109711377   整理番号:20A2760940

超分解能構造化照明顕微鏡法により明らかにされた虚血後の脳骨髄細胞の食細胞状態【JST・京大機械翻訳】

The phagocytic state of brain myeloid cells after ischemia revealed by superresolution structured illumination microscopy
著者 (7件):
資料名:
巻: 16  号:ページ: 1-14  発行年: 2019年 
JST資料番号: U7329A  ISSN: 1742-2094  資料種別: 逐次刊行物 (A)
記事区分: 原著論文  発行国: イギリス (GBR)  言語: 英語 (EN)
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食作用は骨髄細胞の重要な機能であり,脳虚血傷害に高度に関与する。それはin vivoではほとんど研究されておらず,虚血環境で生じる過程の深い知識を防いだ。構造化照明顕微鏡(SIM)は,標準共焦点顕微鏡の分解能限界以下の小胞の動員を含むプロセス,食作用の研究を助ける超解像技術である。マウスは中大脳動脈の永久閉塞を受け,発作後48時間または7日に屠殺した。CD11b,骨髄細胞膜マーカーおよびCD68,リソソームマーカーに対する免疫蛍光を虚血領域で行った。SIMシステムを用いて画像を取得し,SIMチェックで検証した。リソソーム分布を,グレイレベル共起マトリックス(GLCM)により虚血領域で測定した。SIMデータセットを,同じ時点の虚血組織におけるマクロファージの透過型電子顕微鏡画像と比較した。培養ミクログリアをLPSで刺激して100nm蛍光ビーズを取り込み,時間経過SIMにより画像化した。GLCMを用いて細胞質上のビーズ分布を分析した。SIM画像は130nmの分解能に達し,品質管理診断を通過し,可能なアーチファクトを除外した。虚血後,CD68画像に適用したGLCMは,48時間での骨髄細胞が,7日の骨髄細胞より,より高い角二次モーメント(ASM),逆差モーメント(IDM),および低いエントロピーを示し,48時間でより高いリソソームクラスタ化を示した。この時点で,リソソームクラスタ化は細胞膜への近位(<700nm)で,活性標的インターナリゼーションを示したが,7日では,食作用またはオートファジーの最終段階と一致する核周囲であった。Electron顕微鏡画像はリソソーム分布の類似パターンを示し,SIMデータセットを検証した。食作用ミクログリア培養からの時間経過SIMに関するGLCMは,ビーズが取込まれると,ASMとIDMの時間的減少とエントロピーの増加を明らかにし,GLCMが食作用の進行に情報を与えることを示した。SIMデータセットのGLCM分析は,マクロファージ食細胞挙動の異なる相を定量的に説明し,虚血脳におけるリソソーム運動の動力学を明らかにし,初期活性インターナリゼーション対最終消化/オートファジーを示した。Copyright 2020 The Author(s) All rights reserved. Translated from English into Japanese by JST.【JST・京大機械翻訳】
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分類 (1件):
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神経の基礎医学 
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