抄録/ポイント:
抄録/ポイント
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単細胞遺伝子トランスフェクションに対する基質の物理的特性の影響を深く理解するために,単一細胞プラスミドDNAのトランスフェクション効率に及ぼすマトリックス剛性の効果を研究した。高音圧短パルス(0.45MPa,10μs)の超音波を用いて,異なる硬度のゲルマトリックス(柔らかいゲルマトリックス:0.2kPa,硬いゲルマトリックス:40kPa)に培養された機械的に敏感な細胞NIH3T3のプラスミドDNAトランスフェクション実験を行った。実験結果から,硬いゲルマトリックスに培養された細胞は,プラスミドDNAのトランスフェクション効率が柔らかいゲル基質上で培養した細胞より著しく高いことが示された。さらに、プラスミドDNAに対して蛍光標識を行い、異なる剛性基質上の細胞導入プラスミドDNAを培養する方法は異なることが分かった。細胞が硬いゲル基質に培養された時、音響穿孔により産生された小孔が細胞内に進入するプラスミドDNAはより多く、ソフトなゲル基質に培養された細胞は、より多くのプラスミドDNAが非音響穿孔作用により作用できる。細胞骨格蛋白質の分布規則は、硬いゲル基質上で培養した細胞内に、より多くのFアクチンマイクロフィラメントがあり、細胞の伸展形態をよりよく支持し、エンドサイトーシスを比較的容易に起こさないことを示した。柔らかいゲル基質上で培養した細胞内Fアクチンはもっと多く球形状態で存在し、細胞形態は円形にし、この時、エンドサイトーシスがもっと起こりやすい。Data from Wanfang. Translated by JST.【JST・京大機械翻訳】