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J-GLOBAL ID:202002284501140607   整理番号:20A1934188

O-フェニレンジアミンのAg+誘発酸化のホルムアルデヒド阻害に基づくヒストンデメチラーゼ活性のための蛍光および比色二重読み出しアッセイ【JST・京大機械翻訳】

Fluorometric and Colorimetric Dual-Readout Assay for Histone Demethylase Activity Based on Formaldehyde Inhibition of Ag+-Triggered Oxidation of O-Phenylenediamine
著者 (7件):
資料名:
巻: 92  号: 13  ページ: 9421-9428  発行年: 2020年 
JST資料番号: A0395A  ISSN: 0003-2700  CODEN: ANCHAM  資料種別: 逐次刊行物 (A)
記事区分: 原著論文  発行国: アメリカ合衆国 (USA)  言語: 英語 (EN)
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ヒストンデメチラーゼ(HDMs)は,癌治療における後成的調節および重要な標的において不可欠なプレーヤーであるが,HDMs活性を分析するための効果的分子ツールはまだ限られている。興味深いことに,著者らは,O-フェニレンジアミン(OPD)の2,3-ジアミノフェナジン(OPDox)へのAg+誘発酸化の過程が,OPDoxからの蛍光および比色信号の減少により,ホルムアルデヒド(HCHO)によって効率的に阻害されることを見出した。従って,脱メチルプロセスで遊離したHCHOの直接定量に基づくHDMs活性のための新規無標識蛍光及び比色二重読取アッセイを開発した。HCHO定量のためのAg+-OPDに基づく方法の優れた性能に基づいて,リジン特異的デメチラーゼ1-(LSD1)活性は0.3nM(蛍光)と0.5nM(比色)の低い検出限界で成功裏に検出されただけでなく,肉眼でも観察された。さらに,提案したアッセイの実現可能性をさらに広げ,癌細胞溶解物におけるLSD1活性及び混合及び読取操作による阻害を評価した。この無標識,費用効率が高く,高感度二重読取法は,エピジェネティック研究と薬物発見のための貴重なツールを提示する。Copyright 2020 American Chemical Society All rights reserved. Translated from English into Japanese by JST.【JST・京大機械翻訳】
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分類 (2件):
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酵素一般  ,  分光分析 
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