抄録/ポイント：
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ABSTRACT ExoUは日和見病原体Pseudomonas aeruginosaにより哺乳類細胞に直接注入される強力なIII型分泌系エフェクターである。ユビキチン活性化ホスホリパーゼA_2(PLA_2)として,ExoUは膜リン脂質の開裂により細胞毒性を示し,宿主細胞のリシスと先天性免疫応答の阻害をもたらす。最近,ExoUは様々な細菌によりコードされたユビキチン活性化PLA_2酵素のグループに対するモデル蛋白質として確立されている。相同蛋白質のバイオインフォマティクス解析は,蛋白質構造と機能の全体的理解を補完し,増強する強力なアプローチである。相同性研究を行うためには,関心のある推定相同体のスクリーニングおよび検証のための効率的で効果的なツールを持つことが重要である。ここでは,ヒトにコロニー形成し,ヒト感染を生じることが知られている各種の細菌から推定ユビキチン活性化PLA_2酵素をスクリーニングするため,大腸菌に基づく二重発現系を用いた。スクリーニングは複数のユビキチン活性化ホスホリパーゼを効果的に同定し,生物学的および生化学的技術の両方を用いて検証した。本研究では,2つの新しいExoUオーソログを同定し,リケッチア酵素RP534のユビキチン活性化を検証した。逆に,ユビキチンはいくつかの他の試験酵素の活性を調節することができなかった。構造相同性分析に基づいて,Achromobacter xylosoxidansにより発現したグループのユニークなメンバーであるAxoUの機能的性質を予測した。IMPORTANCE細菌ホスホリパーゼは,感染中のリン脂質バリアおよび炎症の破壊を促進する細胞内および細胞外酵素として作用する。活性化の共通機構を有する酵素の同定は,構造的および機能的特性を理解する最初の段階である。これらの特性は,酵素活性を低下させ,宿主細胞死を改善する特異的阻害剤の設計のための重要な情報として役立つ。本研究では,いくつかの細菌病原体から細胞毒性PLA_2酵素を同定し,検証した。グループの創始メンバーと同様に,これらの酵素はユビキチン仲介活性化の性質を共有する。複数の細菌種からの潜在的毒素の同定と検証は,様々な感染を治療するのに有用な汎阻害剤をもたらす構造的洞察を導くための付加的蛋白質を提供する。Please refer to the publisher for the copyright holders. Translated from English into Japanese by JST.【JST・京大機械翻訳】
