抄録/ポイント：
抄録/ポイント
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ABSTRACT研究インフルエンザAウイルス(IAV)は感染細胞におけるウイルスの存在を検出する二次アプローチの使用を必要とする。この問題を克服するために,著者らは蛍光またはルシフェラーゼレポーター遺伝子を発現する組換えIAVを生成した。これらの外来レポーター遺伝子はウイルスの存在を追跡するための有効な代用物として使用できる。しかしながら,ウイルスゲノムに外来配列を組み込むための限られた容量は,研究のタイプに依存して,蛍光またはルシフェラーゼレポーター遺伝子を選択するための研究者を強制する。この制限を回避するために,蛍光及びルシフェラーゼレポーター遺伝子の両方を発現する新規組換複製能バイレポーターIAV(BIRFLU)を操作した。培養細胞において,BIRFLUは野生型(WT)ウイルスに匹敵する増殖速度を示し,抗ウイルス活性を持つ中和抗体または化合物のスクリーニングに用いた。2つのリポーター遺伝子の発現は,蛍光または生物発光によるウイルス阻害の監視を可能にし,読み出しとして1つのリポーター遺伝子の使用に関連する限界を克服する。in vivoで,BIRFLUはマウスを効果的に感染させ,両レポーター遺伝子をin vivoイメージングシステム(IVIS)を用いて検出した。複数の外来遺伝子を有する組換えIAVを生成する能力は,ウイルス-宿主相互作用を研究し,ハイスループットスクリーニング(HTS)でIAVを用いて,IAV感染を制御するために治療腕に取り込むことができる新規抗ウイルス薬を同定するユニークな可能性を開く。さらに,2つの外来遺伝子を発現するウイルスゲノムを遺伝的に操作する能力は,他の病原体感染を治療するためのワクチンベクターとして組換IAVを用いるための新規インフルエンザワクチン開発の可能性と実現可能性を提供する。IMPORTANCEインフルエンザAウイルス(IAV)は,有意な健康および経済的結果と関連するヒト呼吸器疾患を引き起こす。近年,容易に追跡可能な蛍光またはルシフェラーゼレポーター蛋白質を発現する複製能IAVの使用は,インフルエンザ研究の進歩に大きく寄与している。しかし,研究者は,外来配列を含むインフルエンザウイルスゲノムの限られた容量のため,蛍光またはルシフェラーゼレポーター遺伝子を選択する努力を浴びている。この限界を克服するために,in vitroおよびin vivoでIAV感染を追跡するために,2つのレポーター遺伝子(1つの蛍光および1つのルシフェラーゼ)を安定に発現する組換え複製-コンピテントバイレポータIAV(BIRFLU)を初めて作成した。分子生物学,動物研究,およびイメージング技術からの切断エッジ技術の組合せは,研究者が,ウイルス感染の培養細胞および動物モデルにおけるウイルス感染動力学を研究するために,この新世代のレポーター発現IAVを使用するユニークな機会をもたらす。Please refer to the publisher for the copyright holders. Translated from English into Japanese by JST.【JST・京大機械翻訳】
