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J-GLOBAL ID：202002289127044470   整理番号：20A1149273

組換え二重ルシフェラーゼレポーター遺伝子プラスミドpsiCHECK-2-Intronは,ルシフェラーゼとホタルルシフェラーゼ発現にトランスフェクションした。【JST・京大機械翻訳】

Construction of recombinant dual-luciferase reporter gene plasmid psiCHECK-2-Intron and expression of firefly luciferase and renilla luciferase in non-small-cell lung cancer cell line PC-9 after transfection

著者 (3件)： Liao Liang (貴州医科大学附属医院,貴陽,550004) ,  Wang Qinrong (貴州省医学分子生物学重点実験室) ,  Yang Guohui (貴州医科大学附属医院,貴陽,550004)
資料名： Shandong Yiyao  (Shandong Yiyao)
巻： 60  号： 9  ページ： 32-35  発行年： 2020年 
JST資料番号： C3661A  ISSN： 1002-266X  資料種別： 逐次刊行物 (A)
記事区分： 原著論文  発行国： 中国 (CHN)  言語： 中国語 (ZH)

抄録/ポイント： 【目的】組換え二重ルシフェラーゼレポーター遺伝子プラスミドpsiCHECK-2-Intronを構築し,非小細胞肺癌細胞株PC-9のトランスフェクション後にルシフェラーゼとホタルルシフェラーゼ発現を観察する。【方法】プラスミドpsiCHECK-2のキメライントロン(長さ133bp)を,PCRによって増幅し,psiCHECK-2プラスミドに挿入した。組換え二重ルシフェラーゼレポータープラスミドpsi-CHECK-2-Intronを得た。psiCHECK-2-Intronプラスミドを,コンピテント大腸菌に形質移入し,アガロースゲル電気泳動を用いて,目的遺伝子フラグメントの長さを観察し,そして,遺伝子フラグメントを配列した。組換え二重ルシフェラーゼレポーター遺伝子プラスミドpsiCHECK-2-Intron,二重ルシフェラーゼレポータープラスミドpsiCHECK-2をそれぞれPC-9細胞にトランスフェクションし,トランスフェクション群,対照群とした。ルシフェラーゼmRNAとホタルルシフェラーゼmRNAをqRT-PCRによって測定し,ルシフェラーゼ活性およびルシフェラーゼ活性を二重ルシフェラーゼ活性試験によって検出した。【結果】遺伝子断片長は133bpで,遺伝子配列は正しく,突然変異と欠失は無く,組換え二重ルシフェラーゼレポーター遺伝子プラスミドpsiCHECK-2-Intronの構築に成功した。ルシフェラーゼmRNAとホタルルシフェラーゼmRNAの相対的発現は,それぞれ,2.213±0.038と2.004±0.025であり,対照群では,それぞれ1.004±0.012と1.003±0.010であった。Pはすべて<0.05であった。トランスフェクション群におけるルシフェラーゼ活性およびルシフェラーゼ活性は,それぞれ,2.974±0.099および1.948±0.052であり,対照群は,それぞれ,1.000±0.018および1.000±0.020であった(P<0.05)。【結語】組換え二重ルシフェラーゼレポータープラスミドpsiCHECK-2-Intronを成功裏に構築し,psiCHECK-2-IntronをPC-9細胞に形質移入すると,ルシフェラーゼおよびルシフェラーゼ発現が増加した。Data from Wanfang. Translated by JST.【JST・京大機械翻訳】

シソーラス用語： 大腸菌 ,  mRNA ,  *遺伝子 ,  突然変異 ,  *ルシフェラーゼ ,  *プラスミド ,  *トランスフェクション ,  非小細胞肺癌 ,  *レポーター遺伝子 ,  細胞株 ,  *ホタルルシフェラーゼ ,  遺伝子配列 ,  ルシフェラーゼ活性 ,  qRT-PCR法 ,  微生物

分類 (1件)： 分子遺伝学一般  (EC02010J)

タイトルに関連する用語 (7件)： 組換え ,  ルシフェラーゼ ,  レポーター遺伝子 ,  プラスミド ,  ホタルルシフェラーゼ ,  発現 ,  トランスフェクション