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J-GLOBAL ID：202002291251991208   整理番号：20A2404687

ヒト凝固因子IX遺伝子のマウス脂肪幹細胞における安定発現【JST・京大機械翻訳】

Stable expression of human coagulation factor IX in mouse adipose-derived stem cells

著者 (8件)： Li Jie (華北理工大学附属医院血液科,河北 唐山 063000) ,  Xie Yanyan (華北理工大学附属医院血液科,河北 唐山 063000) ,  Wang Xin (華北理工大学附属医院血液科,河北 唐山 063000) ,  Wang Linhong (華北理工大学附属医院血液科,河北 唐山 063000) ,  He Hongxia (華北理工大学附属医院血液科,河北 唐山 063000) ,  Sun Qingyun (華北理工大学附属医院血液科,河北 唐山 063000) ,  Yan Yahui (華北理工大学附属医院血液科,河北 唐山 063000) ,  Yan Zhenyu (華北理工大学附属医院血液科,河北 唐山 063000)
資料名： Zhongguo Shiyan Dongwu Xuebao  (Zhongguo Shiyan Dongwu Xuebao)
巻： 28  号： 4  ページ： 532-538  発行年： 2020年 
JST資料番号： C3084A  ISSN： 1005-4847  資料種別： 逐次刊行物 (A)
記事区分： 原著論文  発行国： 中国 (CHN)  言語： 中国語 (ZH)

抄録/ポイント： 目的:ヒト血液凝固因子IX(hFIX)遺伝子(F9)を運ぶ組換えアデノウイルスをC57BL/6マウスの脂肪間葉系幹細胞(adipose-derivedstemcell,ADSC)にトランスフェクションし、継代培養を行った。F9がADSCで安定的に発現されるかどうかを観察し、ADSCが血友病遺伝子治療のベクター細胞であるかどうかを探った。方法:C57BL/6マウスの鼠径部脂肪を採集し、組織塊懸濁法により、マウスADSCを分離し、継代培養し、hFIX遺伝子とGFP蛍光標識を含む組換えアデノウイルスを用いて、第3世代ADSCにトランスフェクションし、トランスフェクション後、再び継代培養して第4、第3、5世代細胞。蛍光顕微鏡検査にて細胞携帯蛍光数量を観察し、RT-PCRでF9遺伝子発現を測定し、ELISA法で細胞上澄みとWesternBlot検査にて細胞内携帯目的遺伝子の発現蛋白を測定した。結果:(1)組換えアデノウイルスのトランスフェクション後、蛍光顕微鏡下で蛍光発現が見られ、細胞継代後も蛍光が見られた。(2)RT-PCRの結果は,ADSCが,A,B,C群でF9の発現を検出し,D群でF9発現を検出しなかったことを示した。(3)血液凝固因子IX抗原(hFIX)をELISAで測定した。Ag)結果は以下を示した。A群(81.62±8.82)ng/mL、B群(52.50±3.25)ng/mL、C群(47.41±4.00)ng/mLはD群(0.76±0.44)ng/mLより明らかに高かった(P<0。05)。(4)hFIX蛋白質発現は,ウエスタンブロット法で測定し,A群(0.68±0.10),B群(0.49±0.15)およびC群(0.18±0.05)の蛋白質発現は,D群よりも有意に高かった(P<0.05)。差は有意であった(P<0.05)。結論:組換えアデノウイルスをADSCにトランスフェクションした後、継代培養後、高いhFIX活性を発現することができ、血友病遺伝子治療のベクター細胞として用いることができる。Data from Wanfang. Translated by JST.【JST・京大機械翻訳】

シソーラス用語： *凝固 ,  蛍光 ,  *遺伝子 ,  抗原 ,  タンパク質 ,  ヒト ,  蛍光標識 ,  蛍光顕微鏡 ,  継代培養 ,  遺伝子発現 ,  トランスフェクション ,  ベクター ,  RT-PCR法 ,  間葉系幹細胞
準シソーラス用語： 蛋白質発現 , 【Automatic Indexing@JST】

分類 (2件)： 遺伝子操作  (EC02050B) ,  細胞生理一般  (EF02010S)

タイトルに関連する用語 (7件)： ヒト ,  凝固 ,  因子IX ,  遺伝子 ,  マウス ,  脂肪幹細胞 ,  安定発現