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J-GLOBAL ID:202002291659543957   整理番号:20A0193359

P2X3に対するプエラリンの効果の分子機構の探索【JST・京大機械翻訳】

Exploring the molecular mechanism of the effect of puerarin on P2X3
著者 (11件):
資料名:
巻: 142  ページ: 484-491  発行年: 2020年 
JST資料番号: T0898A  ISSN: 0141-8130  CODEN: IJBMDR  資料種別: 逐次刊行物 (A)
記事区分: 原著論文  発行国: オランダ (NLD)  言語: 英語 (EN)
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P2X_3は配位子ゲート非選択的カチオンチャンネルであり,Na+,K+及びCa2+に透過する。一次感覚神経節ニューロン上のP2X_3のアデノシン三リン酸(ATP)活性化は侵害伝達に関与する。プエラリンは伝統的な漢方薬Ge-genから抽出された主要な活性成分である。プエラリンは,後根神経節(DRG)および交感神経節におけるP2X_3を阻害することにより,侵害受容シグナル伝達を阻害するが,その分子機構は不明である。本研究の目的は,P2X_3に及ぼすプエラリンの分子機構を探究することであった。ここでは,分子ドッキング結果は,プエラリンがATP結合ポケットの近傍でヒトP2X_3蛋白質に良く結合することを明らかにした。蛋白質リガンドドッキングは,V64A変異がプエラリンの効果を減少させたが,ATPにはほとんど影響しないことを示した。P2X_3のV64A部位特異的変異誘発を,重複伸長PCR技術を用いて実行した。野生型とV64A変異体pEGFP-C1-P2X_3組換えプラスミドをHEK293細胞にトランスフェクションした。電気生理学の結果は,プエラリンが野生型P2X_3をトランスフェクションしたHEK293細胞においてATP活性化電流に対して明らかな阻害効果を発揮し,一方,変異体P2X_3をトランスフェクションしたHEK293細胞ではほとんど阻害が観察されなかったことを示した。これらの研究はプエラリンがV64Aへの結合によりP2X3を阻害することを示唆する。Copyright 2020 Elsevier B.V., Amsterdam. All rights reserved. Translated from English into Japanese by JST.【JST・京大機械翻訳】
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