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J-GLOBAL ID：202002299728509874   整理番号：20A2557328

DNAリガーゼIVの阻害はマウス脳ニューロンにおけるCRISPR/Cas9仲介ノックイン効率を増強する【JST・京大機械翻訳】

Inhibition of DNA ligase IV enhances the CRISPR/Cas9-mediated knock-in efficiency in mouse brain neurons

著者 (10件)： Cao Xueshan (Department of Molecular and Cellular Physiology, Institute of Medicine, Academic Assembly, Shinshu University, Nagano, 390-8621, Japan) ,  Kouyama-Suzuki Emi (Department of Molecular and Cellular Physiology, Institute of Medicine, Academic Assembly, Shinshu University, Nagano, 390-8621, Japan) ,  Pang Bo (Department of Molecular and Cellular Physiology, Institute of Medicine, Academic Assembly, Shinshu University, Nagano, 390-8621, Japan) ,  Kurihara Taiga (Department of Molecular and Cellular Physiology, Institute of Medicine, Academic Assembly, Shinshu University, Nagano, 390-8621, Japan) ,  Mori Takuma (Department of Molecular and Cellular Physiology, Institute of Medicine, Academic Assembly, Shinshu University, Nagano, 390-8621, Japan) ,  Mori Takuma (Institute for Biomedical Sciences, Interdisciplinary Cluster for Cutting Edge Research, Shinshu University, Nagano, 390-8621, Japan) ,  Yanagawa Toru (Department of Oral and Maxillofacial Surgery, Faculty of Medicine, University of Tsukuba, Ibaraki, 305-8575, Japan) ,  Shirai Yoshinori (Department of Molecular and Cellular Physiology, Institute of Medicine, Academic Assembly, Shinshu University, Nagano, 390-8621, Japan) ,  Tabuchi Katsuhiko (Department of Molecular and Cellular Physiology, Institute of Medicine, Academic Assembly, Shinshu University, Nagano, 390-8621, Japan) ,  Tabuchi Katsuhiko (Institute for Biomedical Sciences, Interdisciplinary Cluster for Cutting Edge Research, Shinshu University, Nagano, 390-8621, Japan)
資料名： Biochemical and Biophysical Research Communications  (Biochemical and Biophysical Research Communications)
巻： 533  号： 3  ページ： 449-457  発行年： 2020年 
JST資料番号： B0118A  ISSN： 0006-291X  資料種別： 逐次刊行物 (A)
記事区分： 短報  発行国： オランダ (NLD)  言語： 英語 (EN)

抄録/ポイント： 子宮内エレクトロポレーションを用いたin vivoニューロンにおけるCRISPR/Cas9仲介遺伝子ノックアウトは強力な技術であるが,ノックイン効率は一般的に低い。著者らは以前,相同指向性修復(HDR)の初期段階の重要な分子であるRAD51との共トランスフェクションが,マウス脳の体性感覚皮質の層2/3における錐体ニューロンにおいて,βアクチン部位におけるEGFPノックイン効率を増加させることを示した。効率をさらに改善するために,非相同末端結合(NHEJ)に対する必須の分子であるDNAリガーゼIV(LIG4)の阻害の影響を調べた。LIG4(shlig4)発現ベクターに対する低分子ヘアピンRNAによる共トランスフェクションは,β-アクチン部位におけるEGFPノックアウト効率を,shlig4のない条件と比較して,3.6倍まで増加させた。RAD51とshlig4発現ベクター共トランスフェクションは,対照条件の4.7倍までノックイン効率をさらに増加させた。これら結果は,LIG4の阻害がRAD51過剰発現より効果的であり,in vivoニューロンでのHDRが仲介する遺伝子ノックダウンに与えるRAD51過剰発現の影響を増強することを示す。Copyright 2020 Elsevier B.V., Amsterdam. All rights reserved. Translated from English into Japanese by JST.【JST・京大機械翻訳】

シソーラス用語： *ニューロン ,  アクチン ,  子宮 ,  指向性 ,  トランスフェクション ,  エレクトロポレーション ,  錐体細胞
準シソーラス用語： βアクチン ,  RAD51 ,  EGFP ,  非相同末端結合 ,  発現ベクター ,  過剰発現 ,  *Cas9 , 【Automatic Indexing@JST】

著者キーワード (6件)： CRISPR/Cas9 ,  DNAリガーゼIV ,  非相同末端結合 ,  相同性指向修復 ,  RAD51 ,  子宮内エレクトロポレーション

分類 (4件)： 遺伝子操作  (EC02050B) ,  核酸一般  (EB04010U) ,  細胞構成体一般  (EF03010Z) ,  腫ようの化学・生化学・病理学  (GE02030N)

タイトルに関連する用語 (10件)： DNAリガーゼIV ,  阻害 ,  マウス ,  脳 ,  ニューロン ,  CRISPR ,  Cas9 ,  仲介 ,  ノック ,  増強