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J-GLOBAL ID:202102210860628159   整理番号:21A0500476

3種類の大豆ウイルスを,増幅内部標準の逆転写酵素ポリメラーゼ連鎖反応(RT-PCR)によって増幅した。【JST・京大機械翻訳】

RT-RPA Technology Included with IAC for Detection of Three Soybean (Glycine max) Viruses
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巻: 28  号: 12  ページ: 2261-2269  発行年: 2020年 
JST資料番号: C2715A  ISSN: 1674-7968  資料種別: 逐次刊行物 (A)
記事区分: 原著論文  発行国: 中国 (CHN)  言語: 中国語 (ZH)
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偽陰性結果は核酸検出結果に影響する主な要因の一つである。増幅内部標準(internalamplificationcontrol,IAC)はPCR過程における偽陰性結果の監視に重要な役割を果たしている。逆転写リコンビナーゼポリメラーゼの常温増幅(reversetranscription-recombinasepolymeraseamplification,RT-RPA)測定における増幅内部標準の応用を探求した。RT-RPA検出過程における偽陰性問題を解決し、本研究では、複合プライマー法により人工的に増幅内部標準を構築し、大豆モザイクウイルス(Soybeanmosaicvirus,SMV)に応用した。インゲンマメ莢斑紋ウイルス(Beanpodmottlevirus,BPMV)及び南方インゲンマメモザイクウイルス(Southernbeanmo?)。saicvirus、SBMV)の3種類の大豆ウイルスRT-RPA検出過程。実験により、確立した方法は目的遺伝子特異性増幅と同時に偽陰性結果を指示することができる。感度試験の結果、50μL反応系において、内部標準の添加量が1.83×104copiesに増幅された時、このシステムのSMV及びBPMVに対する検出感度は0.05ngであった。増幅内部標準の添加量が1.83×103copiesのとき,SBMVに対する検出感度は0.05ngであった。この方法を用いて、10ロットの実際の大豆(Glycinemax)サンプルに対して検出を行い、対応する逆転写PCR(reversetranscription-PCR、RT-PCR)の結果と一致し、良好な適用性を有することが明らかになった。研究結果により、本方法は3種類のウイルスRT-RPA検出過程における偽陰性を有効に指示し、検査結果の信頼性を高め、関連製品の管理に技術サポートと参考根拠を提供できる。Data from Wanfang. Translated by JST.【JST・京大機械翻訳】
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分類 (1件):
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ウイルスによる植物病害 

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