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J-GLOBAL ID:202102213860010929   整理番号:21A0485147

KLF3遺伝子3′-UTR領域の二重ルシフェラーゼレポーターベクターとその突然変異ベクターの構築と活性同定【JST・京大機械翻訳】

Construction and Activity Identification of Dual Luciferase Reporter Vector and Mutation Vector of KLF3 Gene 3′-UTR
著者 (7件):
資料名:
巻: 44  号:ページ: 644-650  発行年: 2017年 
JST資料番号: C3580A  ISSN: 1671-7236  資料種別: 逐次刊行物 (A)
記事区分: 原著論文  発行国: 中国 (CHN)  言語: 中国語 (ZH)
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試験は,亜鉛フィンガー蛋白質3(KLF3)遺伝子3′-UTR領域の二重ルシフェラーゼ遺伝子レポーターベクターとその突然変異ベクターを構築し,KLF3遺伝子発現を調節するmiRNAsを予備的に解析した。KLF3遺伝子の3′-UTR配列をPCRによって増幅し,それをXhoIとNotIの二重ルシフェラーゼレポーターベクターにクローン化した。KLF3遺伝子3′-UTRと相互作用するmiRNAをTargetscanソフトウェアによって予測した。リポフェクタミン2000のトランスフェクション試薬を用いて、miRNAsmicsと構築したKLF3遺伝子3′-UTRの二重ルシフェラーゼレポーターベクターあるいは突然変異ベクターを通常の培養293T細胞に共トランスフェクションし、ルシフェラーゼ活性を測定した。その結果,KLF3遺伝子3′-UTRはmiR-21の標的部位である可能性が示唆された。二重蛍光レポーターは,miR-21mics群(0.6900±0.0144)が,突然変異群(1.000±0.0688)とブランク対照群(1.000±0.)よりも著しく高いことを示した(0.6900±0.0144)。0159)KLF3遺伝子3′-UTR二重ルシフェラーゼ遺伝子レポーターベクターと突然変異ベクターの活性は31%(P<0.01)減少した。本実験では、KLF3遺伝子3′-UTRを含む二重ルシフェラーゼ遺伝子レポーターベクターと突然変異ベクターの構築に成功し、miR-21がKLF3遺伝子に対して調節作用があることを初歩的に証明した。Data from Wanfang. Translated by JST.【JST・京大機械翻訳】
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分子遺伝学一般  ,  遺伝子発現 

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