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J-GLOBAL ID:202102218724244019   整理番号:21A0528249

Bacillus subtilisにおけるα-L-アラビノフラノシダーゼの効率的生産のためのコムギふすま誘導発現系【JST・京大機械翻訳】

A wheat bran inducible expression system for the efficient production of α-L-arabinofuranosidase in Bacillus subtilis
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巻: 144  ページ: Null  発行年: 2021年 
JST資料番号: A0989B  ISSN: 0141-0229  資料種別: 逐次刊行物 (A)
記事区分: 原著論文  発行国: アメリカ合衆国 (USA)  言語: 英語 (EN)
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α-L-アラビノフラノシダーゼ(EC 3.2.1.55;AFs)はキシランのようなヘミセルロースポリマーからアラビノシル残基の放出を引き起こし,キシランの酵素的分解を含むプロセスの範囲で応用できるので,研究注目のレベルが増加している。細菌AFの分泌生産は以前に試みられていない。本研究では,コムギふすまの酵素分解を利用するために,Bacillus subtilisにおける組換えAFの産生のためのユニークな誘導システムを設計した。T7 RNAポリメラーゼの発現を誘導し,T7プロモーターによるAFの転写を駆動するとき,非澱粉フィトケミカルはD-キシロースよりも効率的であることを見出した。宿主細胞,B.subtilis(ATCC 6051a由来株164T7P)を,d-キシロース誘導プロモーター(P_xylA)の制御下でT7 RNAポリメラーゼを発現するDNAカセットを組み込むために操作した。164T7Pに操作されたT7プロモーターは,最初にテストされ,GFP発現に関してP43と比較された;T7プロモーターによるGFPの発現レベルは,P43により達成されたものより10倍高いことを見出した。穏やかな振盪でフラスコで培養して,誘導剤としてD-キシロースを用いて,組換え株は,Bacillus licheniformis由来のファミリー51(GH51)グリコシドヒドロラーゼであるarbfを発現し,141.4±4.8U/mLの酵素を分泌し,Kmは1.4±0.1mM,kcatは139.4s-1であった。しかし,蛋白質は秘密シグナルペプチドを欠いた。小麦ふすまを培養すると,分泌AFの最大収量は194.8±4.1U/mLに達した。結果は,B.subtilisのインデューサとしてふすまを用いた異種蛋白質の高レベル生産に対する基礎を提供する。Copyright 2021 Elsevier B.V., Amsterdam. All rights reserved. Translated from English into Japanese by JST.【JST・京大機械翻訳】
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微生物酵素の生産 
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