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J-GLOBAL ID:202102227276985531   整理番号:21A2841930

ヒトリンパ細胞における遺伝子編集:ドナーDNA,ゲノムヌクレアーゼ型および細胞選択法の役割【JST・京大機械翻訳】

Gene Editing in Human Lymphoid Cells: Role for Donor DNA, Type of Genomic Nuclease and Cell Selection Method
著者 (6件):
資料名:
巻:号: 11  ページ: 325  発行年: 2017年 
JST資料番号: U7293A  ISSN: 1999-4915  資料種別: 逐次刊行物 (A)
記事区分: 原著論文  発行国: スイス (CHE)  言語: 英語 (EN)
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プログラマブルエンドヌクレアーゼは,非相同末端結合(NHEJ)または相同組換え(HDR)により修復される特異的部位でDNA切断を導入する。ヒトリンパ細胞におけるゲノム編集は,これらの難感染細胞がHDRによりDNAを非効率的に修復するので,困難である。ここでは,修復鋳型,標的遺伝子座およびゲノムエンドヌクレアーゼのタイプに依存して,ヒトTおよびB細胞系におけるノックアウト(KO)およびノッキング(KI)生成の効率と動力学を推定した。亜鉛フィンガーヌクレアーゼ(ZFN)を用いて,ウイルス粒子を安定に産生し,ヘルパーベクターによるトランスフェクションで感染を仲介するアデノ随伴ウイルス統合部位1(AAVS1)遺伝子座に統合した8.2kbヒト免疫不全ウイルス1型(HIV-1)ΔEnvゲノムを有するJurkatおよびCEM細胞を操作した。ZFNまたはクラスター化された規則的に短いパリンドローム反復(CRISPR/Cas9)二重ニッキング技法により生成されたノックアウトは,リンパ細胞で比較的効率的であった。しかしながら,ポリクローナルソート細胞とは異なり,クローニングにより選択した遺伝子編集細胞は,これら細胞でHIV-1とヒトT細胞白血病ウイルス1型(HTLV-1)の複製により推定したように,機能性で大きな逸脱を示した。特に,ニカーゼ変異と組み合わせた時,最近報告された高忠実度eCas91.1は,標的活性の遺伝子依存性減少を示した。したがって,非標的効果とヌクレアーゼの標的効率の間のバランス,および編集された細胞選択の最適方法の選択は,リンパ細胞における適切な遺伝子機能検証のために考慮されるべきである。Copyright 2021 The Author(s) All rights reserved. Translated from English into Japanese by JST.【JST・京大機械翻訳】
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分類 (2件):
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遺伝子操作  ,  分子遺伝学一般 
引用文献 (28件):
  • Kim, Y.G.; Cha, J.; Chandrasegaran, S. Hybrid restriction enzymes: Zinc finger fusions to Fok I cleavage domain. Proc. Natl. Acad. Sci. USA 1996, 93, 1156-1160.
  • Miller, J.C.; Holmes, M.C.; Wang, J.; Guschin, D.Y.; Lee, Y.L.; Rupniewski, I.; Beausejour, C.M.; Waite, A.J.; Wang, N.S.; Kim, K.A.; et al. An improved zinc-finger nuclease architecture for highly specific genome editing. Nat. Biotechnol. 2007, 25, 778-785.
  • Christian, M.; Cermak, T.; Doyle, E.L.; Schmidt, C.; Zhang, F.; Hummel, A.; Bogdanove, A.J.; Voytas, D.F. Targeting DNA double-strand breaks with TAL effector nucleases. Genetics 2010, 186, 757-761.
  • Li, T.; Huang, S.; Jiang, W.Z.; Wright, D.; Spalding, M.H.; Weeks, D.P.; Yang, B. TAL nucleases (TALNs): Hybrid proteins composed of TAL effectors and FokI DNA-cleavage domain. Nucleic Acids Res. 2011, 39, 359-372.
  • Cong, L.; Ran, F.A.; Cox, D.; Lin, S.; Barretto, R.; Habib, N.; Hsu, P.D.; Wu, X.; Jiang, W.; Marraffini, L.A.; et al. Multiplex genome engineering using CRISPR/Cas systems. Science 2013, 339, 819-823.
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