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J-GLOBAL ID：202102228489232342   整理番号：21A2112399

哺乳類細胞培養におけるプロリン代謝を研究するためのLC-MS標的メタボロミクス法の開発【JST・京大機械翻訳】

Development of an LC-MS Targeted Metabolomics Methodology to Study Proline Metabolism in Mammalian Cell Cultures

著者 (7件)： Klupczynska Agnieszka (Department of Inorganic and Analytical Chemistry, Poznan University of Medical Sciences, 60-780 Poznan, Poland) ,  Misiura Magdalena (Department of Analysis and Bioanalysis of Medicines, Medical University of Bialystok, 15-222 Bialystok, Poland) ,  Miltyk Wojciech (Department of Analysis and Bioanalysis of Medicines, Medical University of Bialystok, 15-222 Bialystok, Poland) ,  Oscilowska Ilona (Department of Medicinal Chemistry, Medical University of Bialystok, 15-222 Bialystok, Poland) ,  Palka Jerzy (Department of Medicinal Chemistry, Medical University of Bialystok, 15-222 Bialystok, Poland) ,  Kokot Zenon J. (Faculty of Health Sciences, State University of Applied Sciences in Kalisz, 62-800 Kalisz, Poland) ,  Matysiak Jan (Department of Inorganic and Analytical Chemistry, Poznan University of Medical Sciences, 60-780 Poznan, Poland)
資料名： Molecules (Web)  (Molecules (Web))
巻： 25  号： 20  ページ： 4639  発行年： 2020年 
JST資料番号： U7014A  ISSN： 1420-3049  CODEN： MOLEFW  資料種別： 逐次刊行物 (A)
記事区分： 原著論文  発行国： スイス (CHE)  言語： 英語 (EN)

抄録/ポイント： 培養細胞のメタボロミクス研究への関心の高まりは,完全な代謝物プロファイルをフィンガープリンティングできるだけでなく,選択された代謝物のグループの正確な定量を可能にする標的方法も開発する必要がある。プロリン代謝は,コラーゲン生合成,酸化還元バランス,エネルギー過程および細胞内シグナリングを含む,細胞レベルで多くの重要な過程に影響する。本研究は,プロリン代謝に密接に関連するプロリンとその他の2つのアミノ酸,グルタミン酸とアルギニンの細胞内レベルの決定のためのロバストで使い易い標的メタボロミクス法の開発を目的とした。本法は,細胞溶解物中の標的代謝物の信頼できる検出と定量のために,親水性相互作用液体クロマトグラフィーとそれに続く高分解能,正確な質量分析を利用する。試料調製は,氷-冷メタノールの添加とその後の急冷溶液への細胞スクラップによる急冷からなる。方法の検証は,許容できる直線性(r>0.995),精度(%RSD<15%),および正確度(88.5108.5%)を示した。創傷治癒のモデルにおけるHaCaT自然不死化ヒトケラチン細胞を用いたパイロット研究を実施し,プロリン代謝における障害の研究における方法の有用性を示した。開発した方法は,3種の重要なアミノ酸の細胞内濃度を決定する必要性に対処し,標的哺乳類細胞培養メタボロミクス研究に日常的に使用できる。Copyright 2021 The Author(s) All rights reserved. Translated from English into Japanese by JST.【JST・京大機械翻訳】

シソーラス用語： 質量分析 ,  生合成 ,  アミノ酸 ,  コラーゲン ,  *細胞培養 ,  代謝産物 ,  ヒト ,  試料調製 ,  培養細胞 ,  急冷 ,  *LC-MS分析 ,  ロバスト性 ,  窒素複素環化合物 ,  脂肪族アミン ,  脂肪族カルボン酸 ,  第一アミン
準シソーラス用語： *メタボロミクス , 【Automatic Indexing@JST】

著者キーワード (5件)： メタボロミクス ,  細胞培養 ,  プロリン ,  アミノ酸 ,  液体クロマトグラフィー-質量分析

分類 (2件)： 植物の生化学  (EH01050J) ,  生薬の薬理の基礎研究  (GX06020J)

物質索引 (2件)： プロリン ,  アルギニン

引用文献 (56件)：

• Zhang, A.; Sun, H.; Xu, H.; Qiu, S.; Wang, X. Cell Metabolomics. Omics 2013, 17, 495-501.
• Sims, J.K.; Manteiga, S.; Lee, K. Towards high resolution analysis of metabolic flux in cells and tissues. Curr. Opin. Biotechnol. 2013, 24, 933-939.
• Balcke, G.; Kolle, S.; Kamp, H.; Bethan, B.; Looser, R.; Wagner, S.; Landsiedel, R.; Van Ravenzwaay, B. Linking energy metabolism to dysfunctions in mitochondrial respiration-A metabolomics in vitro approach. Toxicol. Lett. 2011, 203, 200-209.
• Van Vliet, E.; Morath, S.; Eskes, C.; Linge, J.P.; Rappsilber, J.; Honegger, P.; Hartung, T.; Coecke, S. A novel in vitro metabolomics approach for neurotoxicity testing, proof of principle for methyl mercury chloride and caffeine. Neuro Toxicol. 2008, 29, 1-12.
• Kleinstreuer, N.C.; Smith, A.; West, P.; Conard, K.; Fontaine, B.; Weir-Hauptman, A.; Palmer, J.A.; Knudsen, T.; Dix, D.; Donley, E.; et al. Identifying developmental toxicity pathways for a subset of ToxCast chemicals using human embryonic stem cells and metabolomics. Toxicol. Appl. Pharmacol. 2011, 257, 111-121.

タイトルに関連する用語 (7件)： 哺乳類細胞培養 ,  リン代謝 ,  研究 ,  LC-MS ,  標的 ,  メタボロミクス ,  開発