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J-GLOBAL ID:202102233086383712   整理番号:21A0071025

Acidithiobacillus ferrooxidans ATCC23270におけるpet IIオペロンのプロモーター領域の調節機構【JST・京大機械翻訳】

A regulation mechanism for the promoter region of the pet II operon in Acidithiobacillus ferrooxidans ATCC23270
著者 (5件):
資料名:
巻: 533  号:ページ: 1142-1147  発行年: 2020年 
JST資料番号: B0118A  ISSN: 0006-291X  資料種別: 逐次刊行物 (A)
記事区分: 短報  発行国: オランダ (NLD)  言語: 英語 (EN)
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Acidithiobacillus ferrooxidans ATCC23270は,鉄および硫黄の酸化を介して,グラム陰性および独立栄養性桿菌属である。ペットIIオペロンはA.ferrooxidansの硫黄代謝に関与する。しかし,pet IIオペロンの発現を制御する機構はほとんど理解されていない。著者らは以前にAFE2726蛋白質がpet IIオペロンの発現と関連することを報告した。ここでは,pet IIオペロン発現の調節におけるAFE2726の関与を分析した。最初に,pEGF-pet IIと名付けたpet IIオペロンのプロモーターにより駆動されるpEGF組換えベクターを構築した。次に,上記のベクターを含むDH5α E.coli培養をNa_2S_2O_3中で培養し,この培地は緑色蛍光蛋白質の発現を実質的に増強した。pet IIオペロンに対するAFE2726の調節効果を調べるために,AFE2726に対するC62/V及びC72/V変異体を部位特異的欠失法を用いてpEGF-pet IIベクターにおいて構築した。pEFG-pet IIおよびpEFG-pet II-Δ-C62/Vと比較して,pEFG-pet II-Δ-C72/Vは,Na_2S_2O_3培地中でDH5α E.coliに形質転換した時,緑色蛍光蛋白質の発現を劇的に低下させた。これは,72番目のシステインがAFE2726蛋白質の重要な残基であり,チオ硫酸ナトリウムに対するpet IIオペロンの応答に影響することを示唆した。さらに,pet IIオペロンのプロモーター上のAFE2726の結合部位を電気泳動移動度シフトアッセイ(EMSA)を用いて同定し,それは-65から-32の範囲の34bp反転反復配列(IR4と命名)であることを見出した。要約すると,著者らの結果は,AFE2726蛋白質がそのプロモーター領域におけるIR4配列への結合によりpet IIオペロンを調節し,その機能がCys72残基対応物へのNa_2S_2O_3結合により影響を受けることを示した。Copyright 2021 Elsevier B.V., Amsterdam. All rights reserved. Translated from English into Japanese by JST.【JST・京大機械翻訳】
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遺伝子発現  ,  細胞生理一般 
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