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J-GLOBAL ID：202102234585257976   整理番号：21A2113140

活性組換えヒトDPP4の新規精製手順とSARS-CoV-2を結合するためのDPP4の不可能性【JST・京大機械翻訳】

A Novel Purification Procedure for Active Recombinant Human DPP4 and the Inability of DPP4 to Bind SARS-CoV-2

著者 (21件)： Xi Cecy R (Centenary Institute, Faculty of Medicine and Health, The University of Sydney, Sydney, NSW 2006, Australia) ,  Fazio Arianna Di (Centenary Institute, Faculty of Medicine and Health, The University of Sydney, Sydney, NSW 2006, Australia) ,  Nadvi Naveed Ahmed (Centenary Institute, Faculty of Medicine and Health, The University of Sydney, Sydney, NSW 2006, Australia) ,  Nadvi Naveed Ahmed (Research Portfolio Core Research Facilities, The University of Sydney, Sydney, NSW 2006, Australia) ,  Patel Karishma (Faculty of Science, School of Life and Environmental Sciences, The University of Sydney, Sydney, NSW 2006, Australia) ,  Xiang Michelle Sui Wen (Centenary Institute, Faculty of Medicine and Health, The University of Sydney, Sydney, NSW 2006, Australia) ,  Zhang Hui Emma (Centenary Institute, Faculty of Medicine and Health, The University of Sydney, Sydney, NSW 2006, Australia) ,  Deshpande Chandrika (Faculty of Science, School of Life and Environmental Sciences, The University of Sydney, Sydney, NSW 2006, Australia) ,  Deshpande Chandrika (Drug Discovery, Sydney Analytical, Core Research Facilities, The University of Sydney, Sydney, NSW 2006, Australia) ,  Low Jason K K (Faculty of Science, School of Life and Environmental Sciences, The University of Sydney, Sydney, NSW 2006, Australia) ,  Wang Xiaonan Trixie (Centenary Institute, Faculty of Medicine and Health, The University of Sydney, Sydney, NSW 2006, Australia) ,  Chen Yiqian (Centenary Institute, Faculty of Medicine and Health, The University of Sydney, Sydney, NSW 2006, Australia) ,  McMillan Christopher L D (School of Chemistry and Molecular Biosciences, The University of Queensland, St Lucia, QLD 4072, Australia) ,  Isaacs Ariel (School of Chemistry and Molecular Biosciences, The University of Queensland, St Lucia, QLD 4072, Australia) ,  Osborne Brenna (Centenary Institute, Faculty of Medicine and Health, The University of Sydney, Sydney, NSW 2006, Australia) ,  Ribeiro Ana Julia Vieira de (Centenary Institute, Faculty of Medicine and Health, The University of Sydney, Sydney, NSW 2006, Australia) ,  McCaughan Geoffrey W (Centenary Institute, Faculty of Medicine and Health, The University of Sydney, Sydney, NSW 2006, Australia) ,  McCaughan Geoffrey W (AW Morrow GE & Liver Centre, Royal Prince Alfred Hospital, Camperdown, NSW 2050, Australia) ,  Mackay Joel P (Drug Discovery, Sydney Analytical, Core Research Facilities, The University of Sydney, Sydney, NSW 2006, Australia) ,  Church W Bret (Faculty of Medicine and Health, School of Pharmacy, The University of Sydney, Sydney, NSW 2006, Australia) ,  Gorrell Mark D (Centenary Institute, Faculty of Medicine and Health, The University of Sydney, Sydney, NSW 2006, Australia)
資料名： Molecules (Web)  (Molecules (Web))
巻： 25  号： 22  ページ： 5392  発行年： 2020年 
JST資料番号： U7014A  ISSN： 1420-3049  CODEN： MOLEFW  資料種別： 逐次刊行物 (A)
記事区分： 原著論文  発行国： スイス (CHE)  言語： 英語 (EN)

抄録/ポイント： プロテアーゼは,しばしば基質の生物学的機能を変化させる不可逆的翻訳後修飾を触媒する。プロテアーゼジペプチジルペプチダーゼ4(DPP4)は,主にグルカゴン様蛋白質-1を不活性化するため,2型糖尿病治療における薬理学的標的である。DPP4は脂肪変性,インシュリン抵抗性,癌および炎症および線維症疾患にも役割を持つ。加えて,DPP4はMERSウイルスのスパイク蛋白質に結合し,ウイルスに対するヒト細胞表面受容体である。DPP4はSARS-CoV-2スパイク蛋白質の潜在的結合標的として同定されたので,この疑問は実験的研究を必要とする。蛋白質の構造と機能を理解することは,生産と精製のための信頼できるプロトコルを必要とする。著者らは,昆虫細胞で産生された可溶性組換えヒトDPP4(残基29766)を作出するバキュロウイルスのためのそのような戦略を開発した。精製は,種々の硫酸アンモニウム沈殿,疎水性相互作用クロマトグラフィー,固定化金属アフィニティークロマトグラフィーによる一連の染料アフィニティークロマトグラフィー,およびイオン交換クロマトグラフィーを用いた。DPP4のSARS-CoV-2完全長スパイク蛋白質への結合親和性とその受容体結合ドメイン(RBD)を表面プラズモン共鳴とELISAを用いて測定した。この最適化DPP4精製法は,高純度を示す特異的活性>30U/mgの昆虫細胞培養のリットル当たり1から1.8mgの純粋完全活性可溶性DPP4蛋白質をもたらした。DPP4とCoV-2スパイク蛋白質間の特異的結合は表面プラズモン共鳴またはELISAによって検出されなかった。要約すると,高純度高収率可溶性ヒトDPP4の手順を達成し,MERSとは異なり,SARS-CoV-2はヒトDPP4に結合しないことを示した。Copyright 2021 The Author(s) All rights reserved. Translated from English into Japanese by JST.【JST・京大機械翻訳】

シソーラス用語： 最適化 ,  沈殿 ,  炎症 ,  基質 ,  グルカゴン ,  *ヒト ,  アフィニティークロマトグラフィー ,  結合部位 ,  ペプチド結合ヒドロラーゼ ,  生物活性 ,  ELISA ,  線維症 ,  バキュロウイルス科
準シソーラス用語： *ジペプチジルペプチダーゼ4 ,  MERS , 【Automatic Indexing@JST】

著者キーワード (4件)： 組換蛋白質 ,  プロテアーゼ ,  DPP4 ,  Covid-19

分類 (4件)： 生薬の薬理の基礎研究  (GX06020J) ,  グリコシド,配糖体  (CF10057O) ,  抗腫よう薬の基礎研究  (GW16010A) ,  分子構造  (EB03020Y)

引用文献 (58件)：

• Dunaevsky, Y.E.; Tereshchenkova, V.F.; Oppert, B.; Belozersky, M.A.; Filippova, I.Y.; Elpidina, E.N. Human proline specific peptidases: A comprehensive analysis. Biochim. Biophys. Acta 2020, 1864, 129636.
• Enz, N.; Vliegen, G.; De Meester, I.; Jungraithmayr, W. CD26/DPP4-a potential biomarker and target for cancer therapy. Pharmacol. Ther. 2019, in press.
• Gorrell, M.D. Dipeptidyl peptidase IV and related enzymes in cell biology and liver disorders. Clin. Sci. 2005, 108, 277-292.
• Rosenstock, J.; Perkovic, V.; Johansen, O.E.; Cooper, M.E.; Kahn, S.E.; Marx, N.; McGuire, D.K. Effect of Linagliptin vs. Placebo on Major Cardiovascular Events in Adults with Type 2 Diabetes and High Cardiovascular and Renal Risk: The CARMELINA Randomized Clinical Trial. JAMA 2019, 321, 69-79.
• Tanaka, T.; Duke-Cohan, J.S.; Kameoka, J.; Yaron, A.; Lee, I.; Schlossman, S.F.; Morimoto, C. Enhancement of antigen-induced T-cell proliferation by soluble CD26/dipeptidyl peptidase IV. Proc. Natl Acad. Sci. USA 1994, 91, 3082-3086.

タイトルに関連する用語 (7件)： 活性 ,  組換え ,  ヒト ,  DPP4 ,  精製 ,  手順 ,  SARS-CoV-2