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J-GLOBAL ID:202102235743443464   整理番号:21A0023816

ヒト歯髄幹細胞の歯原性分化に関与する長鎖非コードRNAとその競合内因性RNAネットワークのゲノムワイド同定【JST・京大機械翻訳】

Genome-wide identification of long noncoding RNAs and their competing endogenous RNA networks involved in the odontogenic differentiation of human dental pulp stem cells
著者 (11件):
資料名:
巻: 11  号:ページ: 1-15  発行年: 2020年 
JST資料番号: U7397A  ISSN: 1757-6512  資料種別: 逐次刊行物 (A)
記事区分: 原著論文  発行国: イギリス (GBR)  言語: 英語 (EN)
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長鎖非コードRNA(lncRNA)は間葉系幹細胞(MSC)の多重分化において重要な役割を果たす。しかし,ヒト歯髄幹細胞(hDPSC)の歯原性分化におけるlncRNAの調節機構に焦点を当てた研究はほとんどない。hDPSCをin vitroで象牙芽細胞に分化させ,分化および未分化細胞におけるlncRNA,マイクロRNA(miRNA)およびメッセンジャーRNA(mRNA)の発現プロファイルをマイクロアレイにより得た。遺伝子オントロジー(GO)分析,経路分析,および結合部位予測を含むバイオインフォマティクス解析をlncRNAの機能的アノテーションのために実施した。miRNA/象牙質形成関連遺伝子ネットワークとlncRNA関連ceRNAネットワークを構築した。定量的逆転写ポリメラーゼ鎖反応(qRT-PCR)を用いて,選択した遺伝子の発現を検証した。RNA蛍光in situハイブリダイゼーション(FISH),qRT-PCR,およびウェスタンブロット分析を用いて,lncRNA-G043225の位置と機能を調査した。二重ルシフェラーゼレポーターアッセイを行い,miR-588とG043225およびフィブリリン1(FBN1)の結合部位を確認した。132のlncRNAs,114のmiRNAsを同定し,172のmRNAは差次的に発現した。GO分析は,神経原性遺伝子座ノッチ相同体(Notch),Wntおよび上皮成長因子受容体(ERBB)シグナリング経路の調節およびマイトジェン活性化蛋白質キナーゼ(MAPK)活性の活性化が,歯原性分化と関係することを示した。経路分析は,最も有意な経路が,歯原性分化と関係するフォークヘッドボックスO(FoxO)シグナリング経路であることを示した。2つの象牙形成関連遺伝子中心lncRNA関連ceRNAネットワークの構築に成功した。qRT-PCR検証結果はマイクロアレイ分析と一致した。主に細胞質に位置するG043225は,miR-588およびFBN1を介してhDPSCの歯原性分化を促進することが証明された。これは,マイクロアレイを用いたhDPSCの歯原性分化中のlncRNA関連ceRNAネットワークを明らかにする最初の研究であり,幹細胞に基づく象牙質再生のための新規治療と同様に,RNA-RNAレベルでの作用機構を探索する手がかりを提供することができた。Copyright 2021 The Author(s) All rights reserved. Translated from English into Japanese by JST.【JST・京大機械翻訳】
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