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J-GLOBAL ID：202102239632170287   整理番号：21A0722373

CTELS:翻訳停止速度解析のための無細胞システム【JST・京大機械翻訳】

CTELS: A Cell-Free System for the Analysis of Translation Termination Rate

著者 (10件)： Lashkevich Kseniya A. (Belozersky Institute of Physico-Chemical Biology, Lomonosov Moscow State University, 119234 Moscow, Russia) ,  Shlyk Valeriya I. (Belozersky Institute of Physico-Chemical Biology, Lomonosov Moscow State University, 119234 Moscow, Russia) ,  Shlyk Valeriya I. (Department of Molecular Biology, Biological Faculty, Lomonosov Moscow State University, 119991 Moscow, Russia) ,  Kushchenko Artem S. (Belozersky Institute of Physico-Chemical Biology, Lomonosov Moscow State University, 119234 Moscow, Russia) ,  Kushchenko Artem S. (School of Bioengineering and Bioinformatics, Lomonosov Moscow State University, 119234 Moscow, Russia) ,  Gladyshev Vadim N. (Division of Genetics, Department of Medicine, Brigham and Women’s Hospital, Harvard Medical School, Boston, MA 02115, USA) ,  Alkalaeva Elena Z. (Engelhardt Institute of Molecular Biology, Russian Academy of Sciences, 119991 Moscow, Russia) ,  Dmitriev Sergey E. (Belozersky Institute of Physico-Chemical Biology, Lomonosov Moscow State University, 119234 Moscow, Russia) ,  Dmitriev Sergey E. (School of Bioengineering and Bioinformatics, Lomonosov Moscow State University, 119234 Moscow, Russia) ,  Dmitriev Sergey E. (Engelhardt Institute of Molecular Biology, Russian Academy of Sciences, 119991 Moscow, Russia)
資料名： Biomolecules (Web)  (Biomolecules (Web))
巻： 10  号： 6  ページ： 911  発行年： 2020年 
JST資料番号： U7148A  ISSN： 2218-273X  資料種別： 逐次刊行物 (A)
記事区分： 原著論文  発行国： スイス (CHE)  言語： 英語 (EN)

抄録/ポイント： 翻訳終了は,合成ポリペプチドがリボソームから放出されるとき,蛋白質生合成の最終段階である。この複雑なプロセスを理解することは,重要な遺伝子におけるナンセンス突然変異に起因する多くのヒト疾患の治療に重要である。ここでは,無細胞系,CTELS(C末端拡張ルシフェラーゼベース系)における翻訳終了速度の解析のための新しい方法を示した。このアプローチは,C末端伸長ルシフェラーゼをコードする2つのレポーターmRNAのin vitro翻訳反応中の連続的に測定したルシフェラーゼ活性に基づいた。この伸長はリボソームポリペプチドトンネルを占有し,翻訳停止が起こる前に完全に合成された酵素が活性である。対照的に,伸長のないルシフェラーゼ分子は,その放出後にのみ光を放出する。これら2つのレポーターの翻訳動力学を比較し,翻訳終了事象に対応する遅延の可視化を可能にした。翻訳終了速度に及ぼす小分子阻害剤およびリードスルー誘導配列を含むcis-およびtrans-作用成分の影響を検討するため,このアプローチの適用性を示した。CTELSにより,特に終結に及ぼす3UTR長減少の負の影響を系統的に評価した。また,ブラストシジンSは真核生物翻訳系に及ぼすその阻害効果を,主に伸長に影響することにより,また,eRF1末端因子(野生型と非触媒AGQ変異体の両方)の過剰が伸長を妨害することを示した。CTELSによる読込み力学の解析は,漏洩停止コドン状況における一時的失速事象を明らかにし,それはナンセンス抑制の基礎をおそらく定義する。Copyright 2021 The Author(s) All rights reserved. Translated from English into Japanese by JST.【JST・京大機械翻訳】

シソーラス用語： 失速 ,  ポリペプチド ,  mRNA ,  遺伝子 ,  無細胞系 ,  *ルシフェラーゼ ,  可視化 ,  リボソーム ,  真核生物 ,  終止コドン ,  ナンセンス突然変異 ,  野生型 ,  in vitro実験
準シソーラス用語： eRF1 ,  *翻訳停止 , 【Automatic Indexing@JST】

著者キーワード (11件)： 翻訳終結 ,  新生ペプチド放出 ,  ホタルルシフェラーゼ ,  in vitro翻訳システム ,  真核生物放出因子 ,  eRF1 ,  eRF3 ,  eRF1(AGQ)変異体 ,  ブラストジンS ,  3′UTR長 ,  ストップコドンリードスルー

分類 (1件)： 遺伝子発現  (EC02040Q)

引用文献 (118件)：

• Hellen, C.U.T. Translation termination and ribosome recycling in eukaryotes. Cold Spring Harb. Perspect. Biol. 2018, 10.
• Jackson, R.J.; Hellen, C.U.; Pestova, T.V. Termination and post-termination events in eukaryotic translation. Adv. Protein Chem. Struct. Biol. 2012, 86, 45-93.
• Inge-Vechtomov, S.; Zhouravleva, G.; Philippe, M. Eukaryotic release factors (eRFs) history. Biol. Cell 2003, 95, 195-209.
• Kisselev, L.L.; Frolova, L. Termination of translation in eukaryotes. Biochem. Cell Biol. 1995, 73, 1079-1086.
• Frolova, L.Y.; Tsivkovskii, R.Y.; Sivolobova, G.F.; Oparina, N.Y.; Serpinsky, O.I.; Blinov, V.M.; Tatkov, S.I.; Kisselev, L.L. Mutations in the highly conserved GGQ motif of class 1 polypeptide release factors abolish ability of human eRF1 to trigger peptidyl-tRNA hydrolysis. RNA 1999, 5, 1014-1020.

タイトルに関連する用語 (2件)： 翻訳停止 ,  細胞