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J-GLOBAL ID:202102250917981545   整理番号:21A0115251

Omp19遺伝子のバイオインフォマティクス分析,クローン発現,およびELISA法の予備的確立を,本論文で示した。【JST・京大機械翻訳】

Bioinformatics Analysis, Cloning and Expression of Omp19 Gene of Brucella and Preliminary Establishment of ELISA Method
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巻: 47  号: 10  ページ: 3078-3087  発行年: 2020年 
JST資料番号: C3580A  ISSN: 1671-7236  資料種別: 逐次刊行物 (A)
記事区分: 原著論文  発行国: 中国 (CHN)  言語: 中国語 (ZH)
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ブルセラ菌外膜蛋白質19(outermembraneprotein19,OMP19)の構造と機能を更に研究するため、反応原性を有するOMP19の組換えタンパク質を得て、ブルセラ菌間接ELISA抗体検出方法を確立した。OMP19蛋白質のアミノ酸配列をバイオインフォマティクスソフトウェアにより分析し,Omp19遺伝子をPCRによりクローニングし,クローン技術を用いて組換発現ベクターpET-32a-Omp19を構築し,大腸菌BL21(DE3)に形質転換した。発現を誘導し,精製し,ウェスタンブロット法とELISAにより,OMP19蛋白質の反応原性を検出し,間接ELISA法を確立した。結果:OMP19タンパク質N末端に19個のシグナルペプチド配列があり、二次構造はランダムコイルを主とし、OMP19タンパク質は優位抗原エピトープを含む。Omp19遺伝子の原核生物発現ベクターpET-32a-Omp19を,PCRとシームレスクローニングによって首尾よく構築し,OMP19融合蛋白質を成功裏に発現させ,精製して,そのサイズは約35kuであり,理論値と一致した。WesternblottingとELISA法にてOMP19の反応原性を鑑定し、結果はこの蛋白が比較的に良い反応原性があり、しかも包み込み濃度が10μg/mL、一対希釈比が1:50、二抗希釈比が1:8000時である。P/N値は最大で,2.80であった。本研究の結果はブルセラ症の迅速診断方法の確立と新型ワクチンの開発に理論基礎を築いた。Data from Wanfang. Translated by JST.【JST・京大機械翻訳】
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分類 (2件):
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バイオアッセイ  ,  細菌による動物の伝染病 

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