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J-GLOBAL ID：202102266932583261   整理番号：21A0213632

エンドトキシン汚染のない遺伝子操作マウスSINE RNAの調製【JST・京大機械翻訳】

Preparation of genetically engineered murine SINE RNA without endotoxin contamination

著者 (12件)： Liu Xin (Department of Genetics, Hebei Key Lab of Laboratory Animal, Hebei Medical University, 361 Zhongshan East Road, Shijiazhuang 050017, Hebei Province, China) ,  Lv Baixue (Department of Ultrasound, Union Hospital, Tongji Medical College, Huazhong University of Science and Technology, Wuhan 430022, Hubei Province, China) ,  Lv Baixue (Hubei Province Key Laboratory of Molecular Imaging, Wuhan 430022, Hubei Province, China) ,  Yan Lifang (Department of Genetics, Hebei Key Lab of Laboratory Animal, Hebei Medical University, 361 Zhongshan East Road, Shijiazhuang 050017, Hebei Province, China) ,  Khan Murad (Department of Genetics, Hebei Key Lab of Laboratory Animal, Hebei Medical University, 361 Zhongshan East Road, Shijiazhuang 050017, Hebei Province, China) ,  Ji Ning (Department of Genetics, Hebei Key Lab of Laboratory Animal, Hebei Medical University, 361 Zhongshan East Road, Shijiazhuang 050017, Hebei Province, China) ,  Shah Suleman (Department of Genetics, Hebei Key Lab of Laboratory Animal, Hebei Medical University, 361 Zhongshan East Road, Shijiazhuang 050017, Hebei Province, China) ,  Song Zhixue (Department of Genetics, Hebei Key Lab of Laboratory Animal, Hebei Medical University, 361 Zhongshan East Road, Shijiazhuang 050017, Hebei Province, China) ,  Zhao Yufang (Department of Genetics, Hebei Key Lab of Laboratory Animal, Hebei Medical University, 361 Zhongshan East Road, Shijiazhuang 050017, Hebei Province, China) ,  Su Libo (Department of Genetics, Hebei Key Lab of Laboratory Animal, Hebei Medical University, 361 Zhongshan East Road, Shijiazhuang 050017, Hebei Province, China) ,  Wang Xiufang (Department of Genetics, Hebei Key Lab of Laboratory Animal, Hebei Medical University, 361 Zhongshan East Road, Shijiazhuang 050017, Hebei Province, China) ,  Lv Zhanjun (Department of Genetics, Hebei Key Lab of Laboratory Animal, Hebei Medical University, 361 Zhongshan East Road, Shijiazhuang 050017, Hebei Province, China)
資料名： MethodsX  (MethodsX)
巻： 7  ページ： Null  発行年： 2020年 
JST資料番号： W3021A  ISSN： 2215-0161  資料種別： 逐次刊行物 (A)
記事区分： 短報  発行国： オランダ (NLD)  言語： 英語 (EN)

抄録/ポイント： RNAは遺伝子発現の調節において重要な役割を果たし,癌および加齢関連疾患の治療における有効な薬剤として期待される。RNAはE.coliの形質転換後にSDS-NaCl遠心分離により抽出され,遺伝子操作RNAを得る方法である。しかし,この方法による調製RNAはエンドトキシンを含み,in vivoおよび細胞実験での応用を制限する。ここではSDS-NaCl遠心分離法に基づいたSDS-NaCl濾過法を改良した。SDS-NaCl濾過のエンドトキシン除去効率はSDS-NaCl遠心分離より約4.2倍大きかった。Triton X-114相分離を用いて,SDS-NaCI濾過抽出RNA(11.25EU/μg RNA/mlから0.08EU/μg RNA/ml)のエンドトキシン含量をさらに減少させた。本論文で確立された方法を用いて調製したRNAは,in vivoおよび細胞培養実験に対する要求を満たした。ここでは,Triton X-114相分離を組み込んだSDS-NaCl濾過を用いて,SDS-NaCl濾過のエンドトキシン除去効率が,SDS-NaCl濾過によって調製されたSDS-NaCl濾過を用いて,SDS-NaCl濾過のエンドトキシン除去効率が,動物に関するin vivo実験の要求を満たすSDS-NaCl濾過によって調製されるSDS-NaCl遠心分離のものより高いことを,pET-B1as-DE3 E.coli(pET-B1as B1要素を含むpET-B1as発現ベクターによって変換されたDE3)から,内毒素フリーのB1as RNAを調製するプロセスを記述する。”SDS-NaCl濾過”のエンドトキシン除去効率は,SDS-NaCl濾過によって調製されるSDS-NaCl濾過を用いて,SDS-NaCl濾過のエンドトキシン除去効率は,動物に関するin vivo実験のための要求を満たした。Copyright 2021 Elsevier B.V., Amsterdam. All rights reserved. Translated from English into Japanese by JST.【JST・京大機械翻訳】

シソーラス用語： 遠心分離 ,  相分離 ,  塩化ナトリウム ,  *RNA【核酸】 ,  細胞培養 ,  *内毒素 ,  *遺伝子操作 ,  遺伝子発現 ,  in vivo実験
準シソーラス用語： 除去効率 ,  SINE ,  発現ベクター ,  遺伝子操作マウス ,  Triton X-114 , 【Automatic Indexing@JST】

著者キーワード (5件)： 遺伝子操作RNA ,  マウスSINE RNA ,  エンドトキシン ,  SDS-NaClろ過法 ,  Triton X-114相分離

分類 (1件)： 遺伝子発現  (EC02040Q)

タイトルに関連する用語 (6件)： エンドトキシン ,  汚染 ,  遺伝子操作マウス ,  SINE ,  RNA ,  調製