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J-GLOBAL ID:202102273329016436   整理番号:21A2131884

過酸化水素誘導HLE-B3細胞のアポトーシスに及ぼすmiR-24の影響とミトコンドリアSmac/Diablo-XIAP-カスパーゼ-9/3アポトーシス経路との関係【JST・京大機械翻訳】

Effect of miR-24 on hydrogen peroxide-induced apoptosis of HLE-B3 cells and its correlation with Smac/Diablo-XIAP-caspase-9/3 pathway
著者 (4件):
資料名:
巻: 41  号:ページ: 417-421  発行年: 2021年 
JST資料番号: C3739A  ISSN: 1003-5141  資料種別: 逐次刊行物 (A)
記事区分: 原著論文  発行国: 中国 (CHN)  言語: 中国語 (ZH)
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【目的】過酸化水素(H2O2)によって誘発されたHLE-B3細胞のアポトーシスに及ぼすマイクロRNA-24(miR-24)の影響を調査する。ミトコンドリア中の第二のミトコンドリア由来のカスパーゼ活性化因子/低等電位点におけるアポトーシス抑制蛋白質の直接結合タンパク質(thesecondmitochondria-derivedactivatorofcaspase/directIAP-bindingproteinwithlowPI)を分析した。Smac/Diablo)-XIAP-カスパーゼ-9/3のアポトーシス経路の関係。【方法】HLE-B3細胞を対照群,H2O2+miR-24NC群およびH2O2+miR-24阻害剤群に分割した。H2O2+miR-24阻害剤群とH2O2+miR-24NC群の24時間に,miR-24阻害剤,miR-24NCキットに従い,24時間,H2O2群。H2O2+miR-24NC群及びH2O2+miR-24阻害剤群HLE-B3細胞に200μmol・L-1H2O2を24時間介入し、細胞を収集し、後続実験に用いた。正常培養HLE-B3細胞を対照群とした。HLE-B3細胞のmiR-24発現をリアルタイム蛍光定量的PCRによって測定し,HLE-B3細胞の増殖をCCK-8によって測定し,細胞アポトーシスをフローサイトメトリーによって測定し,細胞生存率とアポトーシス率をフローサイトメトリーによって検出した。ミトコンドリア膜電位の変化を,蛍光プローブJC-1によって測定し,ミトコンドリア膜電位を,赤緑色蛍光強度比によって反映した。HLE-B3細胞のミトコンドリアおよび細胞質分画におけるSmac/Diabloおよび細胞質分画におけるXIAP,カスパーゼ-9およびカスパーゼ-3蛋白質の発現を,ウエスタンブロット法により検出した。得られたデータを統計学的に分析した。結果:H2O2濃度が200μmol・L-1より大きい時、細胞生存率は50%以下であり、本実験は200μmol・L-1を最適なH2O2濃度とする。対照群,H2O2+miR-24NC群およびH2O2+miR-24阻害剤群のmiR-24発現量は,それぞれ1.04±0.02,2.73±0.09,2.69±0.07および1.15±0.06であった。対照群と比較して,H2O2群のmiR-24発現は有意に増加した(P<0.05)。H2O2群とH2O2+miR-24NC群と比較すると,H2O2+miR-24阻害剤群ではmiR-24発現が低下した(すべてP<0.05)。しかし,H2O2群とH2O2+miR-24NC群のmiR-24発現に有意差はなかった(P>0.05)。H2O2群とH2O2+miR-24NC群と比較すると,H2O2+miR-24阻害剤群の細胞生存率は有意に増加し,アポトーシス率は有意に減少した(すべてP<0.05)。しかし,H2O2群とH2O2+miR-24NC群の細胞生存率とアポトーシス率に有意差はなかった(すべてP>0.05)。対照群、H2O2+miR-24NC群とH2O2+miR-24阻害剤群の赤緑蛍光強度比はそれぞれ0.24±0.02、0.12±0.02、0.15±0.03、0.31±0.06であった。対照群と比較して,H2O2群の赤色緑の蛍光強度は有意に減少した(P<0.05)。H2O2群およびH2O2+miR-24NC群と比較すると,H2O2+miR-24阻害剤群の赤色緑蛍光強度は,H2O2+miR-24NC群よりも有意に高かった(すべてP<0.05)が,H2O2群とH2O2+miR-24NC群の間では,赤緑色蛍光強度比に有意差があった(P>0.05)が,しかし,H2O2群とH2O2+miR-24NC群の間では,H2O2群とH2O2+miR-24NC群の間に有意差があった。有意差はなかった(P>0.05)。H2O2群およびH2O2+miR-24NC群と比較すると,H2O2+miR-24阻害剤群のミトコンドリア分画におけるSmac/Diablo蛋白質および細胞質分画におけるXIAP蛋白質発現は増加した(すべてP<0.05)。Smac/Diablo,カスパーゼ-9およびカスパーゼ-3の蛋白質発現は,H2O2群およびH2O2+miR-24NC群において,細胞質分画において減少した(すべてP<0.05)。Smac/Diablo蛋白質および細胞質分画におけるXIAP,カスパーゼ-9およびカスパーゼ-3蛋白質の発現は,細胞質分画において有意差を示さなかった(すべてP>0.05)。【結語】miR-24は,ミトコンドリアSmac/Diablo-XIAP-カスパーゼ-9/3のアポトーシス経路を阻害することによって,H2O2によって誘発されたHLE-B3細胞のアポトーシスを抑制する可能性がある。Data from Wanfang. Translated by JST.【JST・京大機械翻訳】
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分類 (2件):
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細胞生理一般  ,  細胞学一般 

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