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J-GLOBAL ID：202102281328077480   整理番号：21A3036246

CD883’-UTR二重ルシフェラーゼレポーターベクターの構築およびmiR-619-5pとの標的検証【JST・京大機械翻訳】

Construction of luciferase reporter vector of CD883’-UTR gene and its targeting relationship with miR-619-5p

著者 (7件)： Li Hui (wei坊医学院基礎医学院山東省高校免疫学重点実験室,山東wei坊261053) ,  Wang Chuhao (wei坊医学院基礎医学院山東省高校免疫学重点実験室,山東wei坊261053) ,  Yuan Chao (wei坊医学院基礎医学院山東省高校免疫学重点実験室,山東wei坊261053) ,  Ma Yuhang (wei坊医学院基礎医学院山東省高校免疫学重点実験室,山東wei坊261053) ,  Wu Xuejiao (wei坊医学院基礎医学院山東省高校免疫学重点実験室,山東wei坊261053) ,  Qin Hao (wei坊医学院公共衛生学院) ,  Lin Zhijuan (wei坊医学院基礎医学院山東省高校免疫学重点実験室,山東wei坊261053)
資料名： Huanjing yu Jiankang Zazhi  (Huanjing yu Jiankang Zazhi)
巻： 37  号： 9  ページ： 817-821,Inside Back Cover  発行年： 2020年 
JST資料番号： C2494A  ISSN： 1001-5914  資料種別： 逐次刊行物 (A)
記事区分： 原著論文  発行国： 中国 (CHN)  言語： 中国語 (ZH)

抄録/ポイント： 目的:CD88遺伝子3’-UTR二重ルシフェラーゼレポーターベクターを構築し、CD88がmiR-619-5pの標的遺伝子であることを検証する。方法:miR-619-5pの下流調節部位を予測し、CD88遺伝子の3’-UTR配列(野生型、WT)を増幅し、miR-619-5pとCD88遺伝子3’-UTR結合部位突然変異配列(突然変異型、Mut)を合成した。それぞれpGL3-Controlvectorと接続した。miR-619-5pアゴニスト(mics)および対照を,それぞれ,pGL3-Controlvector,pGL3-CD883’-UTRMut,pGL3-CD883’-UTRWT,およびpGL3-CD883’-UTRWTに割り付けた。pRL-TKプラスミドをHEK-293T細胞に同時形質移入し,ルシフェラーゼ活性を検出した。胃癌細胞株BGC-823のmiR-619-5p発現を増加させ,リアルタイム蛍光定量的PCR(qRT-PCR)とウエスタンブロット法(ウエスタンブロット)によりCD88発現を検出した。【結果】miR-619-5pは,CD88遺伝子3’-UTRと相補的結合部位を示した。ルシフェラーゼレポーターベクターの構築に成功したことを,配列決定後に証明した。二重ルシフェラーゼレポーター実験は,CD88がmiR-619-5pの標的遺伝子であることを示した。qRT-PCRとウエスタンブロットの結果,miR-619-5pの過剰発現は,対照群と比較して,CD88蛋白質の発現を下方制御した(P<0.05)。結論:CD88はmiR-619-5pの標的遺伝子である。miR-619-5pはCD88遺伝子の3’-UTRと相補的に結合し、miR-619-5pは主に転写後レベルでCD88発現を抑制する。Data from Wanfang. Translated by JST.【JST・京大機械翻訳】

シソーラス用語： 蛍光 ,  遺伝子 ,  タンパク質 ,  突然変異 ,  *ルシフェラーゼ ,  結合部位 ,  プラスミド ,  トランスフェクション ,  野生型 ,  *ベクター ,  ダウンレギュレーション ,  ウェスタンブロット法
準シソーラス用語： アゴニスト ,  標的遺伝子 ,  過剰発現 , 【Automatic Indexing@JST】

分類 (1件)： 分子遺伝学一般  (EC02010J)

タイトルに関連する用語 (3件)： 構築 ,  標的 ,  検証