抄録/ポイント:
抄録/ポイント
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循環無細胞DNAにおけるEGFR変異の検出は,癌に対する個別化治療を可能にする。循環EGFR変異を検出する現在の技術は,中程度感度で高価で時間がかかる。Emerging CRISPRは,医療診断を革命し,核酸検出に大きな有望性を示す。この研究は,血漿中の循環EGFR変異を高感度に検出する簡単な試験としてCRISPR-Cas12aを開発することを目的にした。野生型ゲノムDNAにおけるヘテロ接合EGFR変異(L858RおよびT790M)を含むDNAの連続的希釈試料を,CRISPR-Cas12a系および液滴デジタルPCR(ddPCR)による突然変異に対して同時に試験した。CRISPR-Cas12aシステムは,L858RとT790Mの両方を検出することができ,3時間未満で0.005%の検出限界で,5時間以上の0.05%の検出限界で突然変異を検出した。CRISPR-Cas12a系とddPCRによるEGFR突然変異について,28名の肺癌患者と20名の癌のない個人の血漿試料を試験した。CRISPR-Cas12aシステムは,組織生検がL858R陽性である2つの肺癌患者の血漿中のL858Rを検出することができ,組織生検がT790M.ddPCR陽性である3つの肺癌患者の1つの血漿試料は,同じ2つの血漿サンプルでL858Rを検出し,しかしながら,血漿サンプルのいずれにおいてもT790Mを検出しなかった。原理研究のこの証明は,CRISPR-Cas12a系が循環EGFR変異を迅速かつ高感度に検出でき,従って,潜在的予後または治療的意味を有することを示す。Copyright 2021 The Author(s) All rights reserved. Translated from English into Japanese by JST.【JST・京大機械翻訳】